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酶聯免疫斑點檢測（Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay, ELISpot）技術可在單細胞層面上對抗體分泌細胞及細胞因子分泌細胞進行檢測。對比傳統ELISA技術，ELISpot檢測的靈敏度更高，且檢測的是有生物活性的活細胞分泌抗原的功能。ELISpot是一種關鍵的檢測方法，已廣泛應用于感染性疫苗和腫瘤疫苗的臨床藥效學評估、細胞與基因治療的臨床免疫原性評估等。
義翹神州在抗體開發及生物分析方法開發領域擁有深厚的技術經驗，自主研發了高質量的預包被ELISpot檢測試劑盒，經PVDF板包被、無菌干燥、真空密封包裝等工藝流程制備，批次間一致性高，可精準檢測IFN-γ、IL-2、IL-4等多種關鍵細胞因子，為疫苗研發、免疫治療、藥物篩選等領域的研究提供了有力支持。此外，義翹神州提供一站式的ELISpot檢測服務，以及支持完整的方法學驗證，滿足客戶的不同需求。
ELISpot檢測示意圖
ELISpot試劑盒產品列表
| 分子 | 貨號 | 產品名稱 | 規格 | 產品訂購 |
| IFN-γ | EK11725A | Human IFN-γ ELISpot Kit (ALP) | 1 Kit (96 Tests) | 立即訂購 |
| EK50709A | Mouse IFN-γ ELISpot KIT (ALP) | 立即訂購 | ||
| EK50709B | Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Strips) | 立即訂購 | ||
| IL-2 | EK11848A | Human IL-2 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | |
| EK51061A | Mouse IL-2 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | ||
| IL-4 | EK11846A | Human IL-4 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | |
| EK51084A | Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 | ||
| EK51084B | Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) (Strips) | 立即訂購 | ||
| TNF-α | EK50349A | Mouse TNF-α ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購 |
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產品驗證數據
Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A)
Sino Biological  |
Competitor M  |
The statistical histogram and representative plate images of mouse IFN-γ ELISpot assays. Splenocytes isolated from BALB/c mice were plated in graded densities (5×104–2.5×105 cells/well) and stimulated with Concanavalin A (ConA) for 20 h. Wells containing cells without stimulation served as the negative control.
客戶案例分享
案例一
評估病毒疫苗誘導的細胞免疫應答
| 實驗目的：采用IFN-γ ELISpot法評估病毒疫苗誘導的細胞免疫應答 |
| 檢測因子：Mouse IFN-γ |
| 客戶評價：斑點清晰，背景干凈，實驗結果優于進口品牌 |
| 使用產品：Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A) |
案例二
| 檢測因子： | Mouse IFN-γ, Mouse IL-2, Mouse IL-4 |
| 客戶評價： | 相同刺激下，三種細胞因子均可見大量斑點。與進口品牌相比，義翹神州的FN-γ、IL-2斑點數更多，IL-4斑點也更清晰。 |
| 使用產品： | Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A) Mouse IL-2 ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK51061A) Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK51084A) |
案例三
ELISpot檢測服務
義翹神州擁有先進的酶聯免疫斑點分析儀，能夠實現對ELISpot板上各孔斑點圖像進行全自動采集、計數及分析，支持疫苗、藥物篩選、細胞治療等領域的研究。我們提供專業的ELISpot檢測服務，可根據客戶的具體需求，量身定制合適的檢測分析方案，提供嚴格的方法學驗證，并出具詳細的分析結果報告。另外，我們還提供ELISpot讀板服務，利用儀器進行自動讀板分析，為客戶提供每孔的斑點原始圖像和斑點數結果。
服務范圍疫苗評價、藥物篩選、免疫原性檢測等 服務周期3-5天 交付內容斑點分析結果報告 |
 ELISpot分析儀 |
ELISpot實驗常見問題及改進建議
| 問題描述 | 可能原因 | 改進建議 |
| PVDF膜背景深，著色重 | 洗板不徹底 | 提高洗板次數，每次浸泡1分鐘 |
| 膜未完全干燥 | 確保PVDF膜完全干燥后再讀板 | |
| 陰性對照孔出現斑點 | 培養基、血清或DMSO中的內毒素等污染物激活細胞，導致非特異性斑點產生 | 使用無內毒素的試劑 |
| 細胞被污染 | 在處理板和細胞孵育過程中注意程嚴格無菌操作 | |
| 細胞存活率低 | 優化細胞分離流程，確保細胞活率 >90%，保持功能性 | |
| 斑點形狀不規則或成團 | 細胞破損 | 優化細胞提取流程，確保細胞活性 |
| 細胞聚集 | 鋪板前充分混勻細胞懸液，確保單細胞狀態 | |
| 陽性對照孔斑點數少或斑點模糊 | 酶活力下降 | 提高酶濃度 |
| 顯色試劑溫度低，出現氧化現象 | 使用前將顯色試劑平衡至室溫，避免使用已氧化沉淀試劑 | |
| 刺激物效價低 | 提高刺激物濃度 | |
| 斑點位置不均勻，存在邊緣效應 | 鋪板后移動板子，細胞移位 | 鋪板后避免移動，輕拿輕放，平移放入培養箱 |
| 加刺激物時沖擊力大，沖散細胞 | 改為先加刺激物后加細胞 | |
| 板子堆放導致熱量不均 | 每塊板單獨放置于培養架上，確保熱量均勻分布 | |
| 讀板時即使對參數進行了調整，但孔中斑點密集，無法識別全部斑點 | 細胞過多，斑點融合在一起 | 減少每孔加入的細胞數量 |
ELISpot技術資料
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