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酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)檢測(cè)（Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay, ELISpot）技術(shù)可在單細(xì)胞層面上對(duì)抗體分泌細(xì)胞及細(xì)胞因子分泌細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)比傳統(tǒng)ELISA技術(shù)，ELISpot檢測(cè)的靈敏度更高，且檢測(cè)的是有生物活性的活細(xì)胞分泌抗原的功能。ELISpot是一種關(guān)鍵的檢測(cè)方法，已廣泛應(yīng)用于感染性疫苗和腫瘤疫苗的臨床藥效學(xué)評(píng)估、細(xì)胞與基因治療的臨床免疫原性評(píng)估等。
義翹神州在抗體開(kāi)發(fā)及生物分析方法開(kāi)發(fā)領(lǐng)域擁有深厚的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)，自主研發(fā)了高質(zhì)量的預(yù)包被ELISpot檢測(cè)試劑盒，經(jīng)PVDF板包被、無(wú)菌干燥、真空密封包裝等工藝流程制備，批次間一致性高，可精準(zhǔn)檢測(cè)IFN-γ、IL-2、IL-4等多種關(guān)鍵細(xì)胞因子，為疫苗研發(fā)、免疫治療、藥物篩選等領(lǐng)域的研究提供了有力支持。此外，義翹神州提供一站式的ELISpot檢測(cè)服務(wù)，以及支持完整的方法學(xué)驗(yàn)證，滿足客戶的不同需求。
ELISpot檢測(cè)示意圖
ELISpot試劑盒產(chǎn)品列表
| 分子 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品訂購(gòu) |
| IFN-γ | EK11725A | Human IFN-γ ELISpot Kit (ALP) | 1 Kit (96 Tests) | 立即訂購(gòu) |
| EK50709A | Mouse IFN-γ ELISpot KIT (ALP) | 立即訂購(gòu) | ||
| EK50709B | Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Strips) | 立即訂購(gòu) | ||
| IL-2 | EK11848A | Human IL-2 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購(gòu) | |
| EK51061A | Mouse IL-2 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購(gòu) | ||
| IL-4 | EK11846A | Human IL-4 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購(gòu) | |
| EK51084A | Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購(gòu) | ||
| EK51084B | Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) (Strips) | 立即訂購(gòu) | ||
| TNF-α | EK50349A | Mouse TNF-α ELISpot Kit (ALP) | 立即訂購(gòu) |
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產(chǎn)品驗(yàn)證數(shù)據(jù)
Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A)
Sino Biological  |
Competitor M  |
The statistical histogram and representative plate images of mouse IFN-γ ELISpot assays. Splenocytes isolated from BALB/c mice were plated in graded densities (5×104–2.5×105 cells/well) and stimulated with Concanavalin A (ConA) for 20 h. Wells containing cells without stimulation served as the negative control.
客戶案例分享
案例一
評(píng)估病毒疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答
| 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>采用IFN-γ ELISpot法評(píng)估病毒疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答 |
| 檢測(cè)因子：Mouse IFN-γ |
| 客戶評(píng)價(jià)：斑點(diǎn)清晰，背景干凈，實(shí)驗(yàn)結(jié)果優(yōu)于進(jìn)口品牌 |
| 使用產(chǎn)品：Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A) |
案例二
| 檢測(cè)因子： | Mouse IFN-γ, Mouse IL-2, Mouse IL-4 |
| 客戶評(píng)價(jià)： | 相同刺激下，三種細(xì)胞因子均可見(jiàn)大量斑點(diǎn)。與進(jìn)口品牌相比，義翹神州的FN-γ、IL-2斑點(diǎn)數(shù)更多，IL-4斑點(diǎn)也更清晰。 |
| 使用產(chǎn)品： | Mouse IFN-γ ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK50709A) Mouse IL-2 ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK51061A) Mouse IL-4 ELISpot Kit (ALP) (Cat#: EK51084A) |
案例三
ELISpot檢測(cè)服務(wù)
義翹神州擁有先進(jìn)的酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)分析儀，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)ELISpot板上各孔斑點(diǎn)圖像進(jìn)行全自動(dòng)采集、計(jì)數(shù)及分析，支持疫苗、藥物篩選、細(xì)胞治療等領(lǐng)域的研究。我們提供專業(yè)的ELISpot檢測(cè)服務(wù)，可根據(jù)客戶的具體需求，量身定制合適的檢測(cè)分析方案，提供嚴(yán)格的方法學(xué)驗(yàn)證，并出具詳細(xì)的分析結(jié)果報(bào)告。另外，我們還提供ELISpot讀板服務(wù)，利用儀器進(jìn)行自動(dòng)讀板分析，為客戶提供每孔的斑點(diǎn)原始圖像和斑點(diǎn)數(shù)結(jié)果。
服務(wù)范圍疫苗評(píng)價(jià)、藥物篩選、免疫原性檢測(cè)等 服務(wù)周期3-5天 交付內(nèi)容斑點(diǎn)分析結(jié)果報(bào)告 |
 ELISpot分析儀 |
ELISpot實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題及改進(jìn)建議
| 問(wèn)題描述 | 可能原因 | 改進(jìn)建議 |
| PVDF膜背景深，著色重 | 洗板不徹底 | 提高洗板次數(shù)，每次浸泡1分鐘 |
| 膜未完全干燥 | 確保PVDF膜完全干燥后再讀板 | |
| 陰性對(duì)照孔出現(xiàn)斑點(diǎn) | 培養(yǎng)基、血清或DMSO中的內(nèi)毒素等污染物激活細(xì)胞，導(dǎo)致非特異性斑點(diǎn)產(chǎn)生 | 使用無(wú)內(nèi)毒素的試劑 |
| 細(xì)胞被污染 | 在處理板和細(xì)胞孵育過(guò)程中注意程嚴(yán)格無(wú)菌操作 | |
| 細(xì)胞存活率低 | 優(yōu)化細(xì)胞分離流程，確保細(xì)胞活率 >90%，保持功能性 | |
| 斑點(diǎn)形狀不規(guī)則或成團(tuán) | 細(xì)胞破損 | 優(yōu)化細(xì)胞提取流程，確保細(xì)胞活性 |
| 細(xì)胞聚集 | 鋪板前充分混勻細(xì)胞懸液，確保單細(xì)胞狀態(tài) | |
| 陽(yáng)性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)少或斑點(diǎn)模糊 | 酶活力下降 | 提高酶濃度 |
| 顯色試劑溫度低，出現(xiàn)氧化現(xiàn)象 | 使用前將顯色試劑平衡至室溫，避免使用已氧化沉淀試劑 | |
| 刺激物效價(jià)低 | 提高刺激物濃度 | |
| 斑點(diǎn)位置不均勻，存在邊緣效應(yīng) | 鋪板后移動(dòng)板子，細(xì)胞移位 | 鋪板后避免移動(dòng)，輕拿輕放，平移放入培養(yǎng)箱 |
| 加刺激物時(shí)沖擊力大，沖散細(xì)胞 | 改為先加刺激物后加細(xì)胞 | |
| 板子堆放導(dǎo)致熱量不均 | 每塊板單獨(dú)放置于培養(yǎng)架上，確保熱量均勻分布 | |
| 讀板時(shí)即使對(duì)參數(shù)進(jìn)行了調(diào)整，但孔中斑點(diǎn)密集，無(wú)法識(shí)別全部斑點(diǎn) | 細(xì)胞過(guò)多，斑點(diǎn)融合在一起 | 減少每孔加入的細(xì)胞數(shù)量 |
ELISpot技術(shù)資料
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