賽默飛世爾科技近日在德國漢諾威舉辦的國際生物技術展（Biotechnica 2010）上推出了一款全新的干細胞培養表面- Thermo Scientific Nunclon Vita stem cell culture surface。這種獨特的聚苯乙烯表面能讓人胚胎干細胞（ESC）和誘導多能干細胞（iPSC）直接粘附，形成克隆和生長，而無需滋養層細胞或基質包被。

經驗證，用添加了Rho相關激酶（ROCK）抑制劑的培養基培養的hESC可在Nunclon Vita表面上培養至少10代，而不會喪失多能性，或核型發生改變。因此，Nunclon Vita讓干細胞科學家又向前邁出了重要一步，能對干細胞的培養進行更好的控制，并為下游應用提供了更穩定的細胞供應。

在干細胞培養中排除了基質包被和滋養層細胞，也就意味著實驗可變性減少。與那些需要基質包被和滋養層細胞的操作相比，Nunclon Vita表面耗費的勞力顯然更少。對于擴展的細胞擴增，Nunclon Vita表面更易適應，因為細胞在聚苯乙烯表面上直接生長。此外，這種表面與ROCK抑制劑協同作用，在擴增hESC、iPSC和人胚腎細胞（HEK）時，能實現胰酶傳代或機械傳代。

hESC在Nunclon Vita表面上傳了11代后，仍表達了多能性標志物CD9、OCT4、SSEA4和SOX2。如下圖所示，通過免疫熒光染色確定hESC中多能性標志物的表達。

Nunclon Vita表面也很好地支持了HEK293的粘附和生長，比標準的TC處理表面更好。在培養基中添加ROCK抑制劑Y-27632，能增強HEK293在Nunclon Vita表面的粘附和生長。

對于人誘導多能干細胞，目前已擴增超過3代，且維持了多能性，不過還需要更多研究以了解全部的性能。

賽默飛世爾科技一直致力于開發新型的細胞培養表面。去年，它就曾推出兩款革命性的干細胞培養新表面 – HydroCell和UpCell。

NUNC HydroCell表面為一種具有更低蛋白吸附和更低細胞吸附的新型細胞培養表面，適合懸浮細胞的單細胞培養和細胞簇培養。Nunc HydroCell產品表面是一層特殊的共價-固相、超級親水性聚合物薄層，特殊設計旨在防止懸浮細胞對培養表面的非特異性貼附。某些敏感的懸浮細胞可能在培養過程中受到不必要的激活及分化信號刺激而產生不必要的貼壁現象。此外，Nunc HydroCell表面對細胞培養基中的蛋白成分（包括培養時細胞分泌的蛋白）的吸附性也是極低的。使用Nunc HydroCell表面產品可以得到更均一化的懸浮細胞培養，可保證懸浮細胞的非貼壁狀態，得到更高的細胞產率及細胞分泌蛋白產率，包括涉及單核細胞/巨噬細胞及多種干細胞的細胞培養技術。

NUNC UpCell表面為一種溫度誘導性收獲單個細胞和組織工程細胞的新型細胞培養表面。該表面是一層特殊的均一的共價-固相poly-NIPAAm或poly-PIPAAm多聚物薄層。環境溫度37ºC時該表面為輕度疏水性，適合細胞的貼附和生長，而在低于32ºC時該表面為轉變為親水性，表面將結合水分子并膨脹，從而將貼壁的細胞連同細胞下層細胞外基質（ECM）一同釋放出來。被完整保留的細胞下層ECM確保收獲到的連續細胞層具有完整的細胞極性、細胞-細胞連接、細胞層-細胞層間立體連接，以及細胞層與移植點之間的連接（無需纖維蛋白膠或縫合）。特殊設計使貼壁細胞在溫度變化條件下快速從UpCell培養表面脫落。避免了使用酶法（胰酶）和細胞刮刀分離貼壁細胞對細胞的傷害，從而保持了細胞的活性和細胞表面受體及抗原的完整性。即使是其他方法非常難以分離的貼壁細胞類型和連續細胞層也可以從Nunc UpCell表面輕松脫落分離，并且從Nunc UpCell 表面收獲的細胞層可以疊放培養，從而在無需支架和外源性材料的條件下就能建立三維組織模型和共培養，大大簡化了細胞培養和組織工程技術。

如需索取Nunclon Vita表面的詳細技術資料，請點擊這里。（生物通 余亮）