生物通報道 Western blotting堪稱蛋白質研究中的經典方法。學生物的幾乎無人不曉，即使沒親手做過，也清楚其原理。經典果然是經典，30年來其操作步驟幾乎沒變過，依然是跑膠-轉膜-封閉-孵育-檢測。近兩年，各大公司陸續推出了Western blotting方面的新儀器，如新型轉印系統，確實能省時省力不少，但仍然不能完全克服研究人員在今天面臨的挑戰。Western blotting仍存在重復性差、實驗耗時長、無法準確定量等問題。

近日，美國proteinsimple公司推出了一種Simple Western™分析，徹底改變了整個Western blot。此分析在一臺名為Simon的儀器上開展，Simon將所有實驗步驟自動化，包括蛋白上樣和分離、免疫印跡、洗滌、檢測以及數據的定量分析，讓研究人員從繁重的勞動中解放出來，同時避免了可能影響實驗重復性的人為因素。

無需凝膠、無需轉印，放入您的樣品，按個按鈕，然后就沒事了。幾個小時之后，完全分析好的結果正等著你呢，一切聽上去是不是有點不可思議？那么讓生物通小編帶你看看Simon是如何工作的。

首先，將樣品與Simple Western樣品緩沖液混合，至終濃度1 μg/μL，還原并變性，然后將制備好的樣品、一抗和二抗、化學發光底物分配到384孔分析板的指定孔中。之后，將Simple Western分析緩沖液、毛細管和制備好的分析板放入Simon內，它自動開展所有分析步驟。

當蛋白沿著毛細管內一個堆積和分離基質遷移時，它們分離。分離后的蛋白固定到毛細管壁上。之后利用一抗鑒定目標蛋白，用HRP結合的二抗和化學發光底物檢測蛋白。系統自動報告檢測蛋白的分子量和信號。每次實驗可同時分析最多12個樣品，結果可在3-5小時內獲得。15-150 kDa的目標蛋白均可檢測。軟件報告每個檢測蛋白的分子量、面積、面積百分比和信噪比。

對于傳統的Western blot而言，結果的重復性一直是個挑戰，因為缺乏標準化的操作，且多個操作步驟引入了實驗可變性。而Simple Western分析是完全自動化的，因此結果的重復性更好。整體的定量也大大改善了，因為省去了轉印步驟，從而避免了蛋白轉移的不一致。

有了Simple Western，Western真的簡單了。你可以省下大量時間，干更有意義的工作，同時獲得重復性更好的半定量Western blot結果。大家一定很想知道這臺儀器的價格，小編也想知道，一旦有了最新消息，生物通會立即公布。

如需了解Simple Western的更多信息，請訪問http://china.proteinsimple.com/，或致電4000-863-973。

（生物通 余亮）

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