細胞骨架蛋白（包括肌動蛋白和大量相關蛋白）的變化涉及細胞內物質轉運、細胞運動、增殖等重要功能，也是細胞周期調控和癌轉移研究中的熱點。要評估肌動蛋白及其相互作用蛋白，藥物處理帶來細胞骨架的改變，首先要求特異性、溫和地制備細胞骨架組分，消除細胞其它成分對檢測的干擾。

然而，要做到這一點并不容易，因為細胞骨架不溶于傳統去污劑（Triton-X100）。多年的研究也表明，許多肌動蛋白調控蛋白/磷酸化蛋白一旦激活，會從可溶的胞質區移動到不溶的細胞骨架。這些重要蛋白不溶，問題就變得棘手，如何研究它們的生化改變，如磷酸化和亞硝基化？

為此，默克密理博新開發上市了兩款專門富集細胞骨架的產品。提到蛋白的樣品制備，默克密理博可是專家。它旗下的Calbiochem、Novagen和密理博都提供了多個產品，既能專門抽提某一特定組分，例如細胞核蛋白、細胞器（如線粒體）蛋白等，也可借助特殊配方從一批起始材料分步驟地獲得胞質/膜/胞核/骨架蛋白的亞細胞蛋白質組抽提等。

ProteoExtract 細胞骨架富集及分離試劑盒（ProteoExtract Cytoskeleton Enrichment and Isolation kit）提供了細胞骨架提取緩沖液，可保留非變性粘著斑和肌動蛋白相關蛋白，并選擇性去除可溶的細胞質和核蛋白組分。抽提得到的活性細胞骨架蛋白可用于Western Blot分析，看看某特定蛋白是否出現在細胞骨架組分中，用于蛋白的細胞定位分析。此試劑盒大大提高了低豐度肌動蛋白相關蛋白的檢測和研究能力，而之前這些蛋白一般淹沒在全細胞裂解液的Western blot中。此產品可用于15次反應。

ProteoExtract 細胞骨架富集及分離試劑盒（ProteoExtract Native Cytoskeleton Enrichment and Staining Kit）溫和去除雜蛋白，富集骨架蛋白/相關蛋白，進行原位IF（免疫熒光）染色，大大減少了背景蛋白的干擾。試劑盒中還提供了Vinculin和GAPDH的抗體，便于免疫熒光研究。此產品可用于4個8-well chamber slides實驗。

圖中展示了未處理以及用ProteoExtract 細胞骨架富集及分離試劑盒處理過的HeLa細胞的共聚焦熒光顯微鏡圖像。(A) 利用TRITC結合的Phalloidin檢測F-actin；(B) 用GAPDH抗體和FITC結合的二抗檢測細胞質蛋白，這作為陰性對照；(C) 核復染和所有圖像疊加。利用ProteoExtract試劑盒，成功去除了可溶的細胞質蛋白組分（GAPDH）。

若想了解細胞骨架富集的更多信息，請點擊此處索取資料。（生物通 余亮）