抗體依賴(lài)性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用（ ADCC ）是抗體作用的一種機(jī)制， 病毒感染的細(xì)胞或其他病變細(xì)胞通過(guò)該機(jī)制被識(shí)別進(jìn)而被細(xì)胞介導(dǎo)的免疫系統(tǒng)組分殺傷。Promega公司推出的ADCC Reporter Bioassay (ADCC 報(bào)告基因生物活性檢測(cè)試劑盒 ) 應(yīng)用生物發(fā)光法，通過(guò)測(cè)量 NFAT 信號(hào)通路的活化，定量檢測(cè)治療性抗體 Fc 效應(yīng)因子功能（圖 1 ）。

圖1. ADCC bioassay 示意圖

ADCC 是利用抗體介導(dǎo)藥物殺傷靶癌細(xì)胞的理想機(jī)制。抗體與細(xì)胞表面上的目標(biāo)抗原結(jié)合。如果抗體的 Fc 段同時(shí)結(jié)合到效應(yīng)細(xì)胞（主要為自然殺傷細(xì)胞， natural killer cells ）表面的 Fc γ RIIIa 受體上，兩種類(lèi)型的細(xì)胞即發(fā)生多重交聯(lián)，導(dǎo)致 ADCC 作用機(jī)制通路的激活。 靶細(xì)胞的殺傷是此活化途徑的終點(diǎn)，這一指標(biāo)被用在經(jīng)典的 ADCC 生物活性檢測(cè)中，這些經(jīng)典的檢測(cè)方法利用供者的外周血單核細(xì)胞（ PBMC ）或自然殺傷（ NK ）細(xì)胞亞群作為效應(yīng)細(xì)胞。這些細(xì)胞的應(yīng)答變異性很大，難于制備，并容易引起很高的背景讀數(shù)。

ADCC Reporter Bioassay 選擇了 ADCC 作用機(jī)制通路激活過(guò)程中較早的事件作為檢測(cè)的讀出指標(biāo)：即效應(yīng)細(xì)胞中由 NFAT （活化 T 細(xì)胞核因子）通路介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄的激活。此外， ADCC 報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒使用工程改造的 Jurkat 細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，該細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)了 Fc γ RIIIa 受體（ V158 高親和力突變體）和由 NFAT 應(yīng)答元件驅(qū)動(dòng)表達(dá)的螢火蟲(chóng)螢光素酶。 抗體在 ADCC 作用機(jī)制中的生物活性通過(guò) NFAT 通路活化產(chǎn)生的螢光素酶定量，而效應(yīng)細(xì)胞中的螢光素酶活性通過(guò)生物發(fā)光讀數(shù)定量。檢測(cè)的信號(hào)值高，且背景很低。

ADCC Reporter Bioassay 具有生物活性檢測(cè)所必需的明確的特異性。只有同時(shí)具備帶有正確表面抗原的靶細(xì)胞、正確的特異性抗體及表達(dá) FcγRIIIa 的效應(yīng)細(xì)胞時(shí)才會(huì)獲得良好的檢測(cè)應(yīng)答，其中任一缺失都不能產(chǎn)生應(yīng)答。

特點(diǎn)：

均質(zhì)檢測(cè)，簡(jiǎn)單方便：減少實(shí)驗(yàn)組間變異性。
提供“復(fù)蘇 - 即用”形式的凍存細(xì)胞：無(wú)需繁瑣的細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)操作。
生物發(fā)光法：靈敏，信噪比高。
基于 ADCC 作用機(jī)制研發(fā)：與已有 ADCC 細(xì)胞毒性檢測(cè)相關(guān)，并可替代已有檢測(cè)。
靈活：可調(diào)整至 384 孔板模式。
已使用 FDA- 批準(zhǔn)的抗體進(jìn)行驗(yàn)證。
適用于藥品批簽發(fā)的質(zhì)量控制：指示穩(wěn)定性，卓越的線(xiàn)性度、準(zhǔn)確度和精度。

應(yīng)用：

• 驗(yàn)證 ADCC 作用機(jī)制（或缺少該機(jī)制）。
• 辨別糖基化和 afucosylation 水平。
• 批簽發(fā)質(zhì)量控制檢測(cè) (QC lot release bioassay) 。
• 抗體篩選。

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