提到流式細胞儀，可謂無人不知無人不曉，它的技術綜合性強大到讓人驚嘆！我們先看一段對它定義性的描述：“流式細胞儀是將流體噴射技術、激光技術、空氣技術、γ射線能譜術及電子計算機等技術與顯微熒光光度計密切結合的一種非常先進的檢測儀器。”相信單憑這若干個不知其意的專業詞匯所彰顯出的高端與大氣就已讓研究人員望而卻步了。實際它的高端分兩方面，其一，高端的技術。很少有像流式細胞儀這樣的科研工具能夠將如此多的學科匯聚于一身，所以操作使用起來也就理所當然的復雜與繁瑣了，需要專業的學習與培訓，所以往往有流式細胞儀的地方都要配一位駕馭它的專業技師；其二，高端的價錢。這樣一臺儀器的價錢不是每個實驗室都可承受得起的，所以才導致它定居的地方一般都為大型平臺實驗室，來供多個實驗室或整個學校的使用，這樣一來就出現了一個現有的常見問題—— 僧多粥少，做流式細胞實驗要預約，你的實驗周期完全受到了它的“約會”安排日程表的影響，當我們享受著她帶來的美麗數據的同時，她更像一個可望而不可即的女神一般，讓你歡喜讓你憂... ...

而她，是美國ORFLO公司*新推出的一臺手持式微型流式細胞儀。她的外觀靈巧，完全可將她托放與掌中，便于移動，讓你的實驗地點不再被龐大的儀器所束縛；操作便捷，無需受過專業培訓就可以完成操作，因為所有操作就只有兩步（Plug&Play），上機10秒后就可在彩色觸屏顯示器上看到實驗結果，簡便至極。價錢方面，對于絕大多數的實驗室來說，如果想擁有她，從經濟角度上講是完全可行的。看到這里估計讀者已經迫不及待的想進一步了解和認識她了，下面就由筆者向各位介紹這位靈動、聰慧的姑娘 — MoxiFlow(圖1)。

圖1 MoxiFlow

內 外 兼 修

對于它外觀的小巧此處不再累述（大小規格僅為26×15×15cm），圖片比文字更有說服力（圖2）；儀器內置4500mAh鋰電池，便于在實驗室內的移動和隨意放置；內置軟件程序，480X320pix彩色顯示器可清晰呈現數據結果，讓您一目了然。至于檢測方式，它采用了兩種檢測的完美融合—庫爾特電阻原理與熒光檢測原理：

圖2 手持式流式細胞儀

一、 庫爾特原理（用于檢測細胞大小及數量）
當懸浮于液體中的細胞通過小孔管時，會取代相同體積的液體，在恒定電流設計的電路中導致小孔管內外的電阻發生瞬時變化，產生電位脈沖，而這種脈沖信號的大小和次數與細胞的大小與數目成正比，因此可用于細胞計數及大小的檢測。這正是談到流式細胞儀的歷史而不可避開的庫爾特原理，庫爾特電阻檢測法屬于對細胞個體的測量和三維的測量，不但能準確測量細胞的大小，更能對細胞的絕對數量及濃度進行測量。利用庫爾特原理檢測細胞大小更近真實，而不像激光衍射散射原理會受到染料顏色和濃度的影響。流式細胞儀（FCM,Flow cytometry）,從字面上的cytometry (細胞計數) 也看得出它與細胞計數有著一定的淵源,Wallace Coulter于1947年發明了庫爾特原理，用于血細胞分析，隨后1953年Coulter公司便推出了世界上**臺流式細胞分析儀。而以庫爾特原理為主導技術開發細胞計數儀的ORFLO公司在此推出這樣一臺眾望所歸的微型流式細胞儀也便是名正言順了，并利用其**的薄膜傳感器技術對細胞進行數量、直徑等檢測，獲取更加精準可靠的數據。

二、 熒光檢測（用于檢測熒光信號）
MoxiFlow配置了一根532nm固態激光器和一個PMT，檢測光譜區域為590/40nm ( 可檢測染料：R-PE, PI, Nile Red， Ethidium Homodimer I & III, Sytox Orange等 )。對細胞大小檢測的同時以傳統流式的方法利用激光激發標記在細胞上的特異性熒光染料，并通過PMT進行檢測，獲取熒光信號。

MoxiFlow 即利用了以上兩種檢測方式相結合的方式，在細胞流經小孔管時，同時對細胞的大小、數目及熒光信號進行精確的檢測（如圖3）。

                      圖3 MoxiFlow檢測原理                          圖4 細胞微流膜片

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一、 簡易化操作
微流體系膜片內設細胞過濾功能，所以對于準備上機的細胞懸液無需進行濾網的過濾，直接即可加入膜片孔內準備實驗（如圖4），此外膜片的窗口處為非透明材質做成，形成小的避光暗室，避免了熒光檢測過程中熒光猝滅現象；僅需兩步即可完成所有操作步驟。一，將細胞微流膜片插入檢測口；二，將50μL樣品加入檢測孔內，點擊Play即可開始檢測 （如圖5~6）；僅10秒鐘即可顯示出實驗結果。輸出數據的格式為標準的流式數據格式FCS3.1或.BMP的圖像輸出格式，結果數據可以以散點圖及直方圖（如圖7）的形式表現出來，并可輕松用手觸摸。

                               圖5 放置細胞微流膜片                  圖6 上樣50μL細胞懸液即可檢測

二、 程序化實驗
MoxiFlow將較為常用的流式實驗程序化為軟件中的多個選項 （如圖8，并在不斷更新升級中），在實驗室過程中只需點擊要進行的實驗名稱即可完成相應的數據檢測，如： 細胞活性檢測、 細胞凋亡檢、 多參數分析、細胞大小檢測、熒光珠子檢測、 細胞周期檢測（coming soon）等，使用系統內相應實驗程序即可，應用哪里，點哪里，無需再對電壓、熒光補償等參數進行調整。沒有經過任何專業培訓的人員也可輕松操作完成，可見MoxiFlow解放了科研人員對于流式細胞儀使用操作的繁瑣性及專業性，是對流式細胞儀的一次嶄新的革命。

                    圖7 MoxiFlow 直方圖與散圖                                     圖8 預設應用程序

性 能 表 現

為了展現出MoxiFlow優秀的檢測性能，下面分別將MoxiFlow與臺式流式細胞儀、成像細胞分析系統、血細胞計數板進行比較。結果發現，對于細胞的計數誤差要低于其他類型產品，而計數平均值的變異系數（CV）也是*小的，可見 MoxiFlow對于細胞數量的檢測表現優秀(圖9 左)；對于細胞活性的檢測誤差值與平均活性檢測的波動性（CV）都是*小的，即在對細胞活性檢測的實驗中，MoxiFlow依然很好地保證了數據的精準度和穩定性（圖9 右）。

圖9 MoxiFlow與各種檢測方法的比較

下圖是MoxiFlow細胞凋亡實驗的結果圖，此實驗是用喜樹堿（一種抗癌藥物）對Jurkat 細胞（白血病細胞）分別刺激不同時間（2h，6h，7h）所得到的散點圖。可以評測出該藥物對Jurkat細胞凋亡的作用，并給出各個群落的細胞數量、細胞濃度、占細胞總數的百分比及細胞的平均直徑等信息。

圖10 MoxiFlow對細胞凋亡的檢測

總結

外形的小巧并沒有影響MoxiFlow的應用性能，所謂，麻雀雖小五臟俱全。它可幫你擺脫對流式細胞儀“想愛不敢愛”的矛盾心理，讓流式不再高不可攀，讓細胞在你的掌中流動。

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