動脈粥樣硬化是一種脂質代謝與炎癥性血管病變，是引起心腦血管時間的常見疾病。來自廣州南方醫院的研究者發現動脈粥樣硬化新的分子機制，解釋了斑塊形成過程中非編碼RNA RP5-833A20.1如何通過microRNA和轉錄因子調控了炎癥因子以及細胞內的脂肪運輸過程，有可能對疾病治療產生重要影響。文章發表在2015年《Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology》 （影響因子6.0）。（芯片實驗由康成提供技術服務）

研究背景

動脈粥樣硬化斑塊的形成與血管內皮細胞，血管平滑肌細胞以及巨噬細胞有關。巨噬細胞吞噬大量氧化型低密度脂蛋白膽固醇，導致細胞內脂質堆積，形成泡沫細胞從而促發了動脈粥樣硬化的炎癥反應；構成脂質核心和動脈粥樣硬化病變。lncRNA的研究得到了世界范圍的關注。此前雖然有發現心血管相關lncRNA的報道，然而數目有限，該領域還有廣闊的研究空間。

研究思路

該研究利用THP-1巨噬細胞和THP-1來源的泡沫細胞進行比較，找到100個差異表達的lncRNA,63個mRNA分子（差異倍數大于3，p值小于0.01）。通路網絡分析表明差異表達的基因參與動脈粥樣硬化，G蛋白耦聯受體等重要通路。從差異表達的分子中選擇與疾病相關的轉錄因子NFIA以及位于其內含子中的lncRNA RP5-833A20.1進行深入研究。

過表達和干擾實驗證明lncRNA RP5-833A20.1對NFIA具有負調控作用。分子機制實驗中發現mir-382-5p可結合NFIA的3’ UTR區域抑制NFIA的 表達，而RP5-833A20.1參與了mir-382-5p的成熟加工過程。體外細胞實驗證明RP5-833A20.1/mir-382-5p/NFIA通路調控了炎癥細胞因子的表達以及細胞內的脂肪聚集；小鼠活體實驗發現NFIA過表達顯著抑制斑塊的形成，降低循環系統中的炎癥因子濃度，促進膽固醇代謝的作用，是可能的動脈粥樣硬化治療靶點。
 
研究路線

結果展示

 
圖一： 左圖：聚類圖展示差異表達的lncRNA及mRNA。右圖： lncRNA RP5-833A20.1位于NFIA mRNA內含子中。

圖二： 在THP1巨噬細胞中加入乙酰低密度脂蛋白（Ac-LDL）或氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL），檢測lncRNA RP5-833A20.1以及NFIA在不同劑量和時間點表達量的變化。lncRNA RP5-833A20.1表達量隨劑量（a）和加藥)時間(b)遞增；NFIA mRNA表達量隨劑量（c）和加藥時間（d）遞減。

研究意義

該研究從疾病細胞模型出發，通過芯片篩選以及基因組注釋信息找到重要的lncRNA分子和它的靶標，以microRNA為媒介串聯成一條完整的通路。體外及體內實驗設計系統和完整，找到了關鍵的治療靶點。為的心血管疾病lncRNA研究開拓了研究思路。

作者簡介

王前：南方醫科大學教授，博士生導師，主任醫師。主要研究方向為快速檢驗的分子生物學、循證檢驗醫學等。建成南方醫院臨床快速檢驗實驗室，逐漸形成“重要疾病快速檢驗診斷方法學研究”、“個體化治療相關分子診斷”和“人體生物組織工程研究”等研究方向，在國內檢驗界具有較高知名度。近四年主持國家及省部級科研課題6項，主編專著及教材3部，副主編1部，發表研究論著近百篇，

原文出處
RP5-833A20.1/miR-382-5p/NFIA–Dependent Signal Transduction Pathway Contributes to the Regulation of Cholesterol Homeostasis and Inflammatory Reaction. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2015.