人誘導多能干細胞（Human induced pluripotent stem cells，人iPS細胞) 是一個功能強大的研究工具和疾病模型，因為其具備無限增殖、自我更新、分化為多種細胞類型的能力，而且人iPS細胞還可以再現細胞來源個體的疾病表型和基因型。人iPS細胞結合新的CRISPR/Cas9的基因編輯技術，就可以進行疾病模型中遺傳變異的功能性研究以及更深遠的再生醫學研究。

CRISPR/Cas9系統只需一個Cas9核酸酶結合一個單鏈向導RNA（ single guide RNA，sgRNA)就可以決定其靶向特異性，進行基因編輯 (Jinek et al. 2012)。這兩個組件可以通過多種方法成功導入至靶細胞，如載體表達系統，RNA轉染系統，或直接導入Cas9/sgRNA核糖核蛋白(ribonucleoprotein，RNP)復合物(Sander and Joung 2014)。與載體表達系統相比，直接導入Cas9/sgRNA RNPs提供了一種快速轉入基因編輯實驗的方法，同時脫靶效應的可能性更小 (Kim et al. 2014)。Takara旗下的Clontech品牌提供兩種Cas9/sgRNA RNPs導入方法，即電穿孔（Electroporation）導入系統或者納米囊泡（Gesicle）導入系統，幫助您實現高效的、低脫靶效應的基因編輯。

一旦Cas9/sgRNA RNP復合物被導入, 為了分離和篩選感興趣的基因型，單細胞需要被分離并擴增為克隆細胞系。傳統的hiPS 細胞以集落狀生長和傳代，不利于進行單細胞分離和單細胞培養，為基因編輯后hiPS 細胞建立克隆增加了難度。Takara旗下Cellartis品牌的DEF-CS™ culture system（Asplund et al. 2016）是一個支持無飼養層、基于細胞單層培養的系統，規避了集落狀培養帶來的挑戰，允許單細胞傳代和促進接種的單細胞存活和后續擴增，幫助您獲得基因編輯后感興趣的單細胞克隆。

從開始到結束，Takara全套的人iPS細胞基因編輯工具任您選擇。

Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一個完整的，在無飼養層和成分確定條件下，用于hiPSCs有效擴增和擴大生產的系統。試劑盒包含了從接種單細胞至96孔板到擴增至48孔板過程中所有必要的試劑。單細胞克隆擴增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續培養。

Cellartis iPSC rCas9 Electroporation and Single-Cell Cloning System (Code No. 632643) 是一個完整的系統，允許通過電穿孔的方法對hiPSCs進行有效的基因編輯以及隨后的單細胞克隆形成和擴增至48孔板。該系統中提供了重組Cas9蛋白質，以及產生大量sgRNAs所有必要的試劑，用于電穿孔hiPSCs。系統中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (前面所述) 組份，用于進行基因編輯后的單細胞克隆形成和擴增。單細胞克隆擴增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續培養。

Cellartis iPSC CRISPR/Cas9 Gesicle and Single-Cell Cloning System (Code No. 632642)是一個完整的系統，允許通過gesicle導入Cas9/sgRNA復合物進行有效的基因編輯隨后的單細胞克隆形成和擴增至48孔板。Gesicles是一種無毒的、高效的、替代電穿孔的方法，不依賴昂貴的設備或耗材。系統中提供所有的必要試劑用于產生細胞衍生的納米囊泡（稱做gesicles），來轉導Cas9和sgRNA至hiPSCs。系統中也包括Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit（前面所述）組份，用于進行基因編輯后的單細胞克隆形成和擴增。單細胞克隆擴增后，hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)繼續培養。

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