免疫組庫（Immune Repertoire，IR）是指在任何指定時間，個體的循環系統內所有功能多樣性B細胞和T細胞的總和。

B細胞是適應性免疫應答的重要組成部分，其表面表達B細胞受體（BCR），可以識別病原體中的特定分子模式。了解BCRs圖譜不僅有助于深入了解健康個體中的適應性免疫應答，也有助于了解多種疾病的適應性免疫應答。準確鑒定免疫系統表達的克隆型和同種型有助于全面了解B細胞群體。

Takara Bio新推出的SMART-Seq Human BCR (with UMIs)提供了一種靈敏，準確，優化的BCR庫分析方法。

該試劑盒整合SMART（Switching Mechanism at 5' end of RNA Template）全長cDNA合成技術與5’RACE技術，可捕獲重鏈(IgG/M/D/A/E) 和輕鏈 (IgK/L)基因完整的V(D)J可變區，用于后續NGS分析。同時該試劑盒還包括特別的分子條形碼（UMI），可以消除PCR錯誤或duplication以及測序偏向，從而確保獲得更準確和可靠的結果。此外，搭配使用的雙端特殊index（UDI，Unique Dual Index），可以提供完整的從樣品到文庫構建的實驗體驗。

測序結束后，可以使用Cogent NGS Immune Profiler Software (Cogent IP)，直接對Illumina測序儀的下機數據進行高品質的BCR profiling分析，包括克隆型的鑒定與計數、V(D)J區域的序列分析。

下面就詳細了解一下SMART-Seq Human BCR(with UMIs)吧！

產品特點

◇ 完整的BCR分析—支持分析重鏈(IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) 和輕鏈 (IgK, IgL)
◇ 靈活的樣本起始條件—支持PBMCs (10 ng - 1 μg)、B細胞(1-100 ng)、脾臟或骨髓(10 ng)，全血(100 ng)來源的RNA起始
◇ 添加UMI建庫，獲得更可靠測序數據—SMARTer Oligo上引入UMI，用于校正測序錯誤和PCR偏差
◇ 靈活的測序平臺選擇—可自由選擇V(D)J全長分析，或只分析CDR3
◇ 完整的實驗與分析流程—搭配特別開發的Cogent NGS Immune Profiler Software

流程概要

圖1 SMART-Seq Human BCR(with UMIs)技術流程

產品性能展示

圖2 不同的RNA起始量，均能獲得高靈敏度和重復性的克隆型檢測數據

從10 ng、100 ng和1,000 ng人PBMC細胞總RNA中，利用本試劑盒制備BCR分析IgA、IgD、IgG、IgM、IgK和IgL文庫。使用Cogent NGS Immune Profiler Software分析測序數據。

所以，想開展BCR受體庫分析，并且關注克隆型檢測的靈敏度、特異性與可靠性，但苦于實驗反復優化、文章沒有突破的，這款添加分子標簽的BCR分析試劑盒值得一試！