摘要

間充質干細胞（MSCs）在對抗與衰老相關的組織退化方面顯示出巨大潛力，但其臨床應用受到依賴血清培養條件的限制。在這里，我們報道了一種符合GMP標準的無血清（SF）培養系統，用于人類臍帶MSCs（hUC-MSCs），并證明其分泌組在對抗UVB誘導的皮膚光老化方面比含血清的培養系統更有效，表現為真皮厚度增加、血管生成改善以及衰老相關蛋白水平上調。進一步的研究表明，這種增強的活性與NAMPT水平的升高有關。關鍵的是，預定義的無血清培養基成分FGF2被鑒定為一種通過NAMPT介導的雙功能調節因子，既能延緩MSCs的衰老，又能增強分泌組的抗光老化效果。從機制上講，我們發現細胞外NAMPT通過細胞外囊泡傳遞直接對抗光老化，而細胞內NAMPT則通過FGFR/NAMPT/AMPK信號通路調節與衰老、增殖和凋亡相關的基因，從而協同增強分泌組的抗光老化作用。我們的工作提出了一種基于無細胞分泌組的皮膚抗光老化策略，并展示了FGF2在提高細胞存活率和促進旁分泌活性方面的雙重作用。

圖形摘要

FGF2上調MSCs中的iNAMPT表達，并增強eNAMPT向成纖維細胞的傳遞，以實現MSCs分泌組的抗光老化效果。我們發現，成纖維細胞生長因子2（FGF2）通過FGFR/AKT通路提高MSCs中的NAMPT水平，從而以兩種方式增強MSCs分泌組的抗光老化活性：一是上調的細胞內NAMPT（iNAMPT）激活AMPK通路，延緩細胞衰老、抑制凋亡并促進MSCs增殖；二是增強的eNAMPT通過細胞外囊泡從MSCs分泌組傳遞到成纖維細胞，增加成纖維細胞中的NAD⁺水平。最終，這兩種方式共同導致p16、p21和p53蛋白的表達減少，從而使成纖維細胞增殖并抵抗UVB輻射。

間充質干細胞（MSCs）在對抗與衰老相關的組織退化方面顯示出巨大潛力，但其臨床應用受到依賴血清培養條件的限制。在這里，我們報道了一種符合GMP標準的無血清（SF）培養系統，用于人類臍帶MSCs（hUC-MSCs），并證明其分泌組在對抗UVB誘導的皮膚光老化方面比含血清的培養系統更有效，表現為真皮厚度增加、血管生成改善以及衰老相關蛋白水平上調。進一步的研究表明，這種增強的活性與NAMPT水平的升高有關。關鍵的是，預定義的無血清培養基成分FGF2被鑒定為一種通過NAMPT介導的雙功能調節因子，既能延緩MSCs的衰老，又能增強分泌組的抗光老化效果。從機制上講，我們發現細胞外NAMPT通過細胞外囊泡傳遞直接對抗光老化，而細胞內NAMPT則通過FGFR/NAMPT/AMPK信號通路調節與衰老、增殖和凋亡相關的基因，從而協同增強分泌組的抗光老化作用。我們的工作提出了一種基于無細胞分泌組的皮膚抗光老化策略，并展示了FGF2在提高細胞存活率和促進旁分泌活性方面的雙重作用。

圖形摘要

FGF2上調MSCs中的iNAMPT表達，并增強eNAMPT向成纖維細胞的傳遞，以實現MSCs分泌組的抗光老化效果。我們發現，成纖維細胞生長因子2（FGF2）通過FGFR/AKT通路提高MSCs中的NAMPT水平，從而以兩種方式增強MSCs分泌組的抗光老化活性：一是上調的細胞內NAMPT（iNAMPT）激活AMPK通路，延緩細胞衰老、抑制凋亡并促進MSCs增殖；二是增強的eNAMPT通過細胞外囊泡從MSCs分泌組傳遞到成纖維細胞，增加成纖維細胞中的NAD⁺水平。最終，這兩種方式共同導致p16、p21和p53蛋白的表達減少，從而使成纖維細胞增殖并抵抗UVB輻射。