巨噬細胞攝取修飾后的脂蛋白并形成泡沫細胞是動脈粥樣硬化（AS）發展過程中的關鍵步驟。N7-甲基鳥苷（m7G）在真核生物的RNA轉錄本中經常發生內部甲基化，在多種生理過程中起著重要作用。本研究旨在探討AS中的m7G RNA甲基化特征。我們利用高通量測序技術，在體外AS模型中分析了由氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）誘導的泡沫細胞中的m7G甲基化譜。隨后進行了m7G-seq、RNA-seq、生物信息學分析以及細胞生物學研究，并通過qRT-PCR進一步驗證了結果。此外，還在體內AS小鼠模型以及過表達/敲低SCARB2和RASSF8的細胞中研究了這些基因的作用。體外和體內的油紅O染色實驗證實了動脈粥樣硬化泡沫細胞和小鼠模型的成功建立。在泡沫細胞形成過程中，我們發現了1197個m7G甲基化位點以及430個差異表達的mRNA。生物信息學分析顯示，這些m7G甲基化位點與促性腺激素釋放激素（GnRH）信號通路、細胞骨架依賴的細胞內運輸以及線粒體組織有關，這些因素調控著巨噬細胞的泡沫化過程。此外，還鑒定出28個關鍵差異表達的甲基化基因。在AS細胞模型中，m7G甲基轉移酶（WDR4、METTL1、WBSCR22）的表達水平上調，而與病理過程相關的m7G修飾基因（SCARB2和RASSF8）也得到了證實。免疫熒光染色結果顯示，RASSF8和SCARB2在AS小鼠的斑塊組織中均有表達。最后，研究發現，RASSF8/SCARB2的過表達可促進ox-LDL誘導的RAW264.7細胞的凋亡和脂質積累。我們構建了體外AS的m7G轉錄組圖譜，發現差異甲基化的SCARB2和RASSF8基因可能在巨噬細胞泡沫化過程中起關鍵作用。我們的發現為AS的發病機制提供了新的見解，并為潛在的治療方案提供了依據。

在本研究中，我們利用氧化低密度脂蛋白和ApoE?/?小鼠在體外和體內構建了動脈粥樣硬化（AS）模型，并通過油紅O染色驗證了動脈粥樣硬化泡沫細胞和小鼠模型的成功建立。隨后對細胞模型進行了m7G全轉錄組測序（m7G-seq）、RNA測序（RNA-seq）及細胞生物學分析，并通過qRT-PCR進一步研究了AS中的m7G RNA甲基化特征。此外，還在體內AS小鼠模型以及過表達/敲低SCARB2和RASSF8的細胞中研究了這些基因的作用。結果表明，ox-LDL可誘導RAW264.7細胞的脂質泡沫化轉變，并參與AS的發生。給ApoE?/?小鼠喂食高脂飲食也會促進AS的發展。同時，我們構建了體外AS的m7G轉錄組圖譜，并鑒定出28個關鍵差異表達的甲基化基因。在AS模型中，m7G甲基轉移酶（WDR4、METTL1、WBSCR22）的表達水平上調，與病理過程相關的m7G修飾基因（SCARB2和RASSF8）也得到了證實。RASSF8/SCARB2的過表達可促進ox-LDL誘導的RAW264.7細胞的凋亡和脂質積累。我們的發現表明，差異甲基化的SCARB2和RASSF8基因可能在巨噬細胞泡沫化過程中起關鍵作用，并為AS的發病機制提供了新的見解。