從韓國安城地區茄子根際分離出的Microbacterium sp. MAHUQ-60的基因組序列
《Microbiology Resource Announcements》:Genome sequence of Microbacterium sp. MAHUQ-60 isolated from the rhizosphere of eggplant located in Anseong, South Korea
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時間:2025年12月05日
來源:Microbiology Resource Announcements 0.6
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Microbacterium sp. MAHUQ-60菌株基因組測序完成,該菌株分離自韓國安城茄子根部土壤,基因組大小3,425,239 bp,含5條contig,GC含量69.0%,預測編碼蛋白基因3,194個。
摘要 本研究報道了從2019年韓國安城地區茄子根際分離出的細菌菌株Microbacterium sp. MAHUQ-60的基因組序列草圖。該基因組由3,425,239個堿基對組成,組裝成5個contigs,編碼3,194個預測的蛋白質編碼基因。
公告 Microbacterium 屬由Orla-Jensen首次建立(
1 ),屬于
Microbacteriaceae 科,目前包含166個經過正式發表的物種(
2 ),這些物種來源于多種不同的環境(
3 – 5 )。在研究茄子根際細菌多樣性過程中,分離出了一種新的
Microbacterium 屬菌株,命名為
Microbacterium sp. MAHUQ-60,并在本研究中展示了其基因組草圖。細菌基因組測序是一項具有廣泛應用價值的技術,在醫學、公共衛生和進化研究中都具有重要意義(
6 – 10 )。
MAHUQ-60菌株是從韓國安城地區的一株茄子根際分離得到的。通過輕輕去除附著在植物根部的土壤來收集根際土壤樣本。將1克土壤樣本懸浮在9毫升無菌0.85%(重量/體積)NaCl溶液中,然后逐級稀釋至10
?6 濃度,將100微升稀釋液涂布在營養瓊脂(NA;Difco,BD,目錄號213000)平板上。隨后在30°C條件下培養3天。通過多次劃線傳代在新鮮NA平板上純化單菌落。根據16S rRNA基因序列分析,確定MAHUQ-60菌株屬于
Microbacterium sp. MAHUQ-60。該菌株已存入中國普通微生物菌種保藏中心,保藏編號為CGMCC 1.60115。基因組DNA是從在營養肉湯(Difco,BD,目錄號234000)中培養24小時的細菌中提取的,使用Solgent(韓國)公司的基因組DNA提取試劑盒按照制造商的協議進行提取。利用AMPure XP珠子對DNA片段進行大小篩選,以獲得適合Illumina測序的標準長度(通常為200–300個堿基對)。使用Nextera XT DNA Library Prep Kit(Illumina,美國圣地亞哥)制備測序文庫。測序過程采用Illumina HiSeq 3000平臺,按照制造商提供的標準協議進行雙端2 × 150 bp讀取。使用FastQC(
11 )對讀取數據進行質量控制,并用Trimmomatic(
12 )去除接頭序列和低質量堿基。使用Illumina的bcl2fastq軟件v.2.20.0按默認參數對原始讀取數據進行去重并轉換為FASTQ格式。使用SOAPdenovo v.2.04組裝器(
13 )進行基因組組裝,并利用NCBI Prokaryotic Genome Annotation Pipeline v.6.3(
14 – 16 )進行基因組注釋。通過Type (Strain) Genome Server(
https://tygs.dsmz.de )進行基于全基因組的分類分析。使用Genome-to-Genome Distance生物信息學工具(
17 )計算
in silico DNA-DNA雜交值。與MAHUQ-60基因組最匹配的類型菌株是
Microbacterium suwonense NBRC 106310(登錄號
GCA_030296555 ),其
in silico DNA-DNA雜交值為25.7%。
Microbacterium sp. MAHUQ-60的基因組長度為3,425,239 bp,GC含量為69.0%;蚪M由5個contigs組成,覆蓋率為112倍。共預測出3,253個基因,其中3,194個為蛋白質編碼基因;蚪M特征的詳細信息見
表1 。
表1 MAHUQ-60菌株的基因組數據、組裝信息、注釋和來源信息特征 MAHUQ-60菌株的結果 來源描述 位置 韓國安城 時間 2019年 類型 茄子根際 測序總結 覆蓋率 112倍 基因組大。╞p) 3,425,239 GC含量(%) 69.0 組裝報告 Contigs數量 5 Contig L 50 2 Contig N 50 1.1 Mb 注釋報告 基因總數 3,253 CDS總數 3,198 含蛋白質的CDS數量 3,194 ncRNA數量 3 tRNA數量 46 質量分析 完整性(%) 98.75 污染率(%) 2.73
致謝 特別感謝中國科學院微生物研究所下屬的世界微生物數據中心對MAHUQ-60菌株的基因組測序工作。
M.A.H.:概念設計、數據分析、撰寫(初稿、審閱和編輯);M.Z.S.和M.M.R.:撰寫(審閱和編輯)。
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