銀屑病是一種免疫介導(dǎo)的炎癥性疾病，其特征是皮膚和關(guān)節(jié)的炎癥。大約80%的個(gè)體中，皮膚炎癥（銀屑�。┩ǔＯ扔陉P(guān)節(jié)炎癥（銀屑病關(guān)節(jié)炎，PsA）發(fā)生，約有30%的銀屑病患者會發(fā)展為關(guān)節(jié)炎。這種序貫進(jìn)展提示皮膚與關(guān)節(jié)之間存在機(jī)制上的聯(lián)系，但其潛在機(jī)制尚不清楚。在分子水平上，銀屑病與白細(xì)胞介素-23/白細(xì)胞介素-17（IL-23/IL-17）信號通路以及腫瘤壞死因子（TNF）的活性增加有關(guān)。盡管中和這些細(xì)胞因子能有效緩解銀屑病癥狀，但這些療法并未闡明炎癥如何從皮膚擴(kuò)散到關(guān)節(jié)。

為了解析銀屑病中的皮膚-關(guān)節(jié)軸，研究人員在易發(fā)生關(guān)節(jié)炎的BALB/c品系和具有關(guān)節(jié)炎抗性的C57BL/6品系小鼠中引入了IL-23過表達(dá)（IL-23OE）模型。兩種品系的小鼠在IL-23OE后3天內(nèi)均出現(xiàn)了典型的銀屑病癥狀，包括鱗屑和表皮增生。然而，只有在BALB/c小鼠的踝關(guān)節(jié)中觀察到早期炎癥跡象，并在第21天進(jìn)展為炎癥性關(guān)節(jié)炎，而C57BL/6小鼠則未發(fā)生關(guān)節(jié)炎。兩者均因破骨細(xì)胞活化增強(qiáng)而出現(xiàn)系統(tǒng)性骨丟失，但只有患有關(guān)節(jié)炎的小鼠出現(xiàn)骨增殖性病變。這表明建立了一個(gè)模擬人類銀屑病二分性的模型系統(tǒng)，可用于識別與炎癥從皮膚擴(kuò)散到關(guān)節(jié)相關(guān)的分子差異。

為了追蹤皮膚來源細(xì)胞的再循環(huán)，研究人員使用了光轉(zhuǎn)換Kaede^tg小鼠和光片顯微鏡檢查踝關(guān)節(jié)。IL-23OE誘導(dǎo)了細(xì)胞從皮膚向踝關(guān)節(jié)的顯著遷移，這些細(xì)胞定位于Kager's脂肪墊和滑膜。出乎意料的是，這種遷移在易發(fā)關(guān)節(jié)炎的BALB/c品系和具有關(guān)節(jié)炎抗性的C57BL/6品系中是相當(dāng)?shù)�。通過流式細(xì)胞術(shù)定量分析踝關(guān)節(jié)組織中光轉(zhuǎn)換的皮膚來源Kaede^RED細(xì)胞隨時(shí)間的遷移情況，發(fā)現(xiàn)遷移僅限于CD45⁺白細(xì)胞，最早在第4天開始增加，在第7天達(dá)到峰值，隨后下降。成像流式細(xì)胞術(shù)分析顯示，踝關(guān)節(jié)中存在CD3⁺T細(xì)胞、B220⁺B細(xì)胞以及CD11b⁺（CD3^?B220^?）髓系細(xì)胞從皮膚播散而來。出乎意料的是，髓系細(xì)胞約占遷移細(xì)胞的85%，且在兩種品系中比例相似。Kaede^GREEN和Kaede^RED蛋白均勻的胞質(zhì)分布排除了髓系細(xì)胞間通過吞噬體清除轉(zhuǎn)運(yùn)Kaede^RED蛋白導(dǎo)致關(guān)節(jié)中Kaede^RED信號的可能性。

觀察到銀屑病皮膚來源的細(xì)胞遷移本身并不能預(yù)測隨后關(guān)節(jié)炎的發(fā)生，研究人員旨在詳細(xì)分析皮膚來源和關(guān)節(jié)浸潤的白細(xì)胞。他們生成了皮膚和關(guān)節(jié)駐留的Kaede^GREEN白細(xì)胞（CD45⁺）、基質(zhì)細(xì)胞（CD45^?）以及遷移的Kaede^RED白細(xì)胞（CD45⁺）的綜合單細(xì)胞RNA測序（scRNA-seq）數(shù)據(jù)集。使用均勻流形近似與投影（UMAP）進(jìn)行可視化，證實(shí)關(guān)節(jié)中大多數(shù)遷移的Kaede^RED白細(xì)胞屬于髓系吞噬細(xì)胞簇。隨后的聚類分析識別出五個(gè)不同的亞群，包括MHC-II^?襯里層巨噬細(xì)胞、Hmox1⁺巨噬細(xì)胞、Cd163⁺Lyve1⁺抗炎巨噬細(xì)胞、Aqp1⁺巨噬細(xì)胞和MHC-II⁺（H2⁺）吞噬細(xì)胞。其中三個(gè)亞群，即Hmox1⁺巨噬細(xì)胞、Cd163⁺Lyve1⁺抗炎巨噬細(xì)胞和H2⁺吞噬細(xì)胞，在遷移的Kaede^RED細(xì)胞中顯著富集。然而，它們的豐度在兩個(gè)小鼠品系之間沒有差異，這證實(shí)了遷移本身不足以驅(qū)動炎癥從皮膚擴(kuò)散到關(guān)節(jié)。

為了更好地表征Kaede^RED髓系區(qū)室，研究人員使用免疫基因組計(jì)劃（Immunological Genome Project）單核吞噬細(xì)胞數(shù)據(jù)集進(jìn)行了基于參考的注釋，識別出單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞（DCs）。然后使用CellRank檢查了Kaede^RED吞噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄動力學(xué)和分化潛能，結(jié)合RNA velocity估計(jì)的轉(zhuǎn)錄周轉(zhuǎn)和轉(zhuǎn)錄相似性。CellRank在這些細(xì)胞中識別出幾個(gè)宏觀狀態(tài)，但僅將H2⁺前體細(xì)胞識別為唯一具有分化為H2⁺吞噬細(xì)胞、Hmox1⁺和Cd163⁺Lyve1⁺巨噬細(xì)胞潛能的初始狀態(tài)，這與CellRank輔助的偽時(shí)間估計(jì)完全一致。因此，研究人員將H2⁺吞噬細(xì)胞進(jìn)一步亞聚類為H2⁺DCs、H2⁺巨噬細(xì)胞和H2⁺髓系前體細(xì)胞。在H2⁺吞噬細(xì)胞中，H2⁺髓系前體細(xì)胞可通過Cd2和Ccr2的表達(dá)來區(qū)分，因此將其稱為CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞�；�因本體生物過程（GO-BP）富集分析顯示，與關(guān)節(jié)中其他亞群相比，CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞中遷移相關(guān)通路顯著富集。類似地，與駐留的Kaede^GREEN群體相比，遷移的Kaede^RED吞噬細(xì)胞表現(xiàn)出更高豐度的趨化性和遷移相關(guān)條目。

基于CellRank和GO-BP富集分析，研究人員假設(shè)CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞群體起源于皮膚。利用關(guān)節(jié)CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄譜，通過UCell對皮膚髓系區(qū)室進(jìn)行評分，在皮膚的單核細(xì)胞中識別出了這些髓系前體細(xì)胞。皮膚中的CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞顯示出與細(xì)胞遷移相關(guān)的GO-BP條目的顯著富集。

為了獨(dú)立于Kaede^tg系統(tǒng)確認(rèn)CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞在皮膚和關(guān)節(jié)之間的細(xì)胞運(yùn)輸，研究人員開發(fā)了一種流式細(xì)胞術(shù)策略來檢測關(guān)節(jié)和皮膚中CD11b⁺MHC-II⁺細(xì)胞中的CD2⁺細(xì)胞。與未處理的小鼠相比，IL-23OE在第4天和第7天誘導(dǎo)了BALB/c小鼠皮膚和關(guān)節(jié)中CD2⁺MHC-II⁺髓系前體細(xì)胞的顯著擴(kuò)增。值得注意的是，BALB/c和C57BL/6近交系之間未觀察到差異。在IL-23OE后，骨髓或小腸中未觀察到CD2⁺MHC-II⁺髓系前體細(xì)胞的顯著增加。由于這兩個(gè)器官都受到IL-23OE的影響，這一發(fā)現(xiàn)支持了皮膚是關(guān)節(jié)中這些細(xì)胞來源的概念。

接下來，研究人員通過整合滑膜組織（健康N=3，PsA N=5）的單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)集，探究人類中是否存在類似的遷移機(jī)制。通過無監(jiān)督聚類將髓系細(xì)胞亞聚類為11個(gè)不同的細(xì)胞身份，并根據(jù)其基因表達(dá)譜進(jìn)行標(biāo)記。使用單細(xì)胞注釋變分推斷（scANVI）整合和參考映射，旨在髓系區(qū)室內(nèi)找到生物學(xué)相關(guān)的人鼠同源群體。除了小鼠和人類的DC亞群外，研究人員觀察到小鼠CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞與人類CCR2⁺單核細(xì)胞亞群之間的共現(xiàn)程度最高。人類CCR2⁺單核細(xì)胞表達(dá)CD2和HLA-DR，與小鼠CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞一致。使用UCell對小鼠髓系細(xì)胞進(jìn)行人類髓系前體特征的反向檢測，證實(shí)了人與小鼠CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞之間的高度相似性。

為了將CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞追蹤到皮膚，研究人員將人類滑膜髓系細(xì)胞簇整合到現(xiàn)有的皮膚髓系細(xì)胞單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)集中（包含健康供體N=5、銀屑病患者N=3和特應(yīng)性皮炎（AD）患者N=4的樣本）。使用scANVI轉(zhuǎn)移將滑膜髓系特征映射到預(yù)注釋的真皮髓系細(xì)胞，揭示了滑膜CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞與原本稱為“炎癥巨噬細(xì)胞”的真皮髓系細(xì)胞之間存在高度共現(xiàn)。

在人和小鼠的皮膚和滑膜中觀察到CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞的同源群體后，研究人員試圖在人類中追蹤它們在這兩個(gè)組織之間的遷移。他們假設(shè)，從皮膚遷移到關(guān)節(jié)的細(xì)胞會表現(xiàn)出比駐留細(xì)胞或來自兩個(gè)器官內(nèi)不同來源的細(xì)胞顯著更高的共享體細(xì)胞線粒體突變流行率。研究人員生成了三個(gè)匹配的個(gè)體（早期PsA N=1，有發(fā)展為PsA風(fēng)險(xiǎn)的銀屑病N=2）的皮膚和關(guān)節(jié)組織的單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)集。此外，使用線粒體改變富集從單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組建立親緣關(guān)系（MAESTER）方法，特別富集并測序了線粒體轉(zhuǎn)錄本的cDNA，以檢測線粒體體細(xì)胞突變。使用保守的質(zhì)量和特異性閾值進(jìn)行信息性變異檢測，在皮膚和滑膜之間識別出中位數(shù)為12個(gè)共享變異。這些變異大多數(shù)存在于髓系細(xì)胞中，少數(shù)存在于T細(xì)胞中。值得注意的是，CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞表現(xiàn)出最高的保守體細(xì)胞線粒體突變富集�？紤]到方法學(xué)可能偏向于髓系細(xì)胞（鑒于其推測更短的壽命和近期源于骨髓前體，這可能導(dǎo)致體細(xì)胞變異更好地保存），研究人員分析了浸潤滑膜的S100A12??單核細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)它們與CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞相比共享變異更少，與T細(xì)胞相當(dāng)。對滑膜髓系簇基于共享變異程度進(jìn)行排序（包括和排除與皮膚共享的變異），使用基于圖譜的譜系追蹤，在包含保守的皮膚變異時(shí)，將CD2??MHC-II??CCR2??髓系細(xì)胞識別為最早的前體細(xì)胞。該分析還證實(shí)了其他關(guān)節(jié)髓系簇中的共享變異源自CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞，排除了其他遷移來源。為了排除選擇信息性變異的標(biāo)準(zhǔn)影響結(jié)果的可能性，研究人員進(jìn)行了迭代分析，為每個(gè)選擇標(biāo)準(zhǔn)定義可變范圍。正如預(yù)期，髓系細(xì)胞在100%的迭代中 consistently 表現(xiàn)出與皮膚細(xì)胞最高數(shù)量的共享變異。在髓系簇內(nèi)，CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞在大約70%的迭代中 consistently 排名第一。這些結(jié)果共同證明了人類CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞同源物的存在及其在皮膚和滑膜之間保守的遷移。

研究人員探究了疾病背景是否影響人類受累器官中CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞的數(shù)量。與小鼠中的觀察一致，研究人員發(fā)現(xiàn)與健康對照個(gè)體相比，PsA個(gè)體的滑膜組織中CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞顯著增加。這種增加在有發(fā)展為PsA風(fēng)險(xiǎn)的銀屑病個(gè)體中也很明顯。相比之下，來自初治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）個(gè)體的滑膜髓系細(xì)胞在其前體細(xì)胞中未表現(xiàn)出任何CD2表達(dá)。這突出了CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞獨(dú)特的疾病特異性和皮膚特異性特征。

在人類皮膚中，銀屑病患者的CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞顯著多于健康對照個(gè)體。作為概念驗(yàn)證，在病因與銀屑病不同的特應(yīng)性皮炎（AD）中未觀察到CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞的顯著增加。這些發(fā)現(xiàn)證實(shí)了CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞在皮膚和滑膜組織中的共現(xiàn)，其在病理?xiàng)l件下增加，與小鼠中的觀察一致。

最后，為了支持它們沿皮膚-關(guān)節(jié)軸遷移的假設(shè)，研究人員測試了皮膚播散的再循環(huán)前體細(xì)胞是否可在人類外周血單核細(xì)胞（PBMC）組分中檢測到。研究人員將滑膜組織髓系細(xì)胞的單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)集與現(xiàn)有的PBMC數(shù)據(jù)集（來自健康供體N=20和銀屑病患者（銀屑病N=24；PsA N=19））進(jìn)行整合。除了基因表達(dá)數(shù)據(jù)，該數(shù)據(jù)集部分包含蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)，允許基于抗體染色的表面標(biāo)記區(qū)分細(xì)胞。使用scANVI將滑膜注釋轉(zhuǎn)移到PBMC的基于蛋白質(zhì)組學(xué)的預(yù)注釋上，揭示了滑膜CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞與CD14⁺血液單核細(xì)胞之間的高度共現(xiàn)。映射的滑膜CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞在CD14⁺血液單核細(xì)胞中形成一個(gè)亞群，揭示了一個(gè)可被抗體識別的CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞的獨(dú)特群體。比較不同條件下髓系群體的豐度顯示，PsA患者血液中CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞增加。總之，研究人員提供了證據(jù)表明CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞不僅在循環(huán)中，而且在銀屑病患者的皮膚和滑膜組織中增加，完全反映了動物模型中的觀察結(jié)果。

由于CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞是一個(gè)相當(dāng)動態(tài)的群體，在到達(dá)關(guān)節(jié)后分化為幾個(gè)亞群，研究人員想知道局部組織微環(huán)境是否影響這一過程。使用基于軌跡的差異表達(dá)分析（tradeSeq），研究人員比較了CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞在BALB/c和C57BL/6小鼠之間隨偽時(shí)間的基因表達(dá)譜變化。在具有關(guān)節(jié)炎抗性的C57BL/6小鼠中觀察到最小變化，而BALB/c小鼠顯示出與基線更大的偏離。差異動態(tài)基因的GO-BP分析揭示了與具有關(guān)節(jié)炎抗性的C57BL/6小鼠相比，BALB/c小鼠中幾個(gè)促炎通路的存在。相應(yīng)地，用UCell對髓系吞噬細(xì)胞簇進(jìn)行促炎和抗炎反應(yīng)評分顯示，來自BALB/c小鼠的Kaede^RED細(xì)胞促炎反應(yīng)更高，而來自C57BL/6小鼠的Kaede^RED細(xì)胞抗炎反應(yīng)更高。主要由襯里層和Aqp1⁺巨噬細(xì)胞組成的Kaede^GREEN區(qū)室在兩種背景品系中均未顯示顯著的抗炎或促炎活化。這些分析首先證明皮膚來源的Kaede^RED細(xì)胞是炎癥的關(guān)鍵調(diào)節(jié)者，其次，關(guān)節(jié)微環(huán)境在引導(dǎo)該區(qū)室向促炎或抗炎活化中起關(guān)鍵作用。

因此，研究人員使用CellChat探索遷移的前體細(xì)胞與其局部微環(huán)境之間的相互作用，揭示了Kaede^RED吞噬細(xì)胞與微環(huán)境之間在兩種品系中均存在強(qiáng)大的通信概率。Kaede^RED遷移細(xì)胞的整體通信強(qiáng)度高于Kaede^GREEN駐留細(xì)胞。最強(qiáng)的通信概率發(fā)現(xiàn)于Kaede^RED吞噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞之間，并且預(yù)測C57BL/6小鼠中的相互作用強(qiáng)于BALB/c小鼠。為了解析推定的相互作用伙伴，研究人員根據(jù)之前的報(bào)告對關(guān)節(jié)中的成纖維細(xì)胞區(qū)室進(jìn)行了亞聚類。識別出滑膜襯里和襯下成纖維細(xì)胞，后者被亞聚類為Thbs1⁺、Il6⁺、Cd200⁺和Pi16⁺成纖維細(xì)胞，以及軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞。觀察到成纖維細(xì)胞和Kaede^RED吞噬細(xì)胞之間存在高相互作用概率后，研究人員使用UCell對C57BL/6小鼠與BALB/c小鼠相比成纖維細(xì)胞特異性差異表達(dá)基因進(jìn)行評分。Cd200⁺成纖維細(xì)胞顯示出最高評分，認(rèn)為該群體是微環(huán)境中的關(guān)鍵決定因素。MELD分析顯示，Cd200⁺成纖維細(xì)胞在C57BL/6小鼠中比在BALB/c小鼠中更可能被發(fā)現(xiàn)。最后，研究人員使用流式細(xì)胞術(shù)定量關(guān)節(jié)中CD200⁺成纖維細(xì)胞（CD45^?CD31^?PDPN⁺PDGFRα⁺CD200⁺THY1⁺CD49f^?）在IL-23OE前后第7天的豐度。與單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)集一致，研究人員在BALB/c小鼠中觀察到IL-23OE后CD200⁺成纖維細(xì)胞顯著減少，但在C57BL/6小鼠中未觀察到。這種減少與遷移峰值時(shí)間相吻合。這些發(fā)現(xiàn)共同表明，關(guān)節(jié)炎不僅受CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞從皮膚向關(guān)節(jié)遷移的控制，也受關(guān)節(jié)中CD200⁺成纖維細(xì)胞的調(diào)控。

CD200已知與四種不同的受體相互作用，其中編碼CD200R1的基因在小鼠單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)集中表達(dá)最豐富。與之前報(bào)告一致，研究人員在少量T細(xì)胞和2型先天淋巴樣細(xì)胞（ILC2s）及髓系細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了Cd200r1轉(zhuǎn)錄本。特別是，數(shù)據(jù)集在髓系細(xì)胞中的高細(xì)胞分辨率允許更詳細(xì)地分析該區(qū)室中的表達(dá)，研究人員在CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞中觀察到Cd200r1轉(zhuǎn)錄本的豐度最高。背景品系之間的表達(dá)沒有顯著差異。在功能上，當(dāng)研究人員將骨髓單核細(xì)胞與滑膜成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，并使用抗CD200單克隆抗體（OX-90）阻斷CD200–CD200R1相互作用時(shí)，觀察到骨髓單核細(xì)胞中促炎表型的誘導(dǎo)，伴有更高的Il1b、Il6和Tnf表達(dá)。這些發(fā)現(xiàn)表明CD200⁺成纖維細(xì)胞通過CD200–CD200R1軸在關(guān)節(jié)中形成保護(hù)性屏障。

為了進(jìn)一步驗(yàn)證這一假設(shè)，研究人員采用了四種不同的方法。首先，檢驗(yàn)增加遷移細(xì)胞數(shù)量是否會放大炎癥。為此，他們在IL-23OE第7天從BALB/c小鼠中分離皮膚來源的CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞進(jìn)行過繼轉(zhuǎn)移。他們還分離了一個(gè)對應(yīng)于關(guān)節(jié)中Kaede^RED群體的CD11c^?CCR7^?CLEC10A⁺CD11b⁺巨噬細(xì)胞群體。分選的細(xì)胞在IL-23OE第7天重新引入BALB/c小鼠的踝關(guān)節(jié)，以與CD200⁺成纖維細(xì)胞減少相吻合，并增加關(guān)節(jié)中遷移細(xì)胞的庫量。在第14天通過組織學(xué)和MRI評估炎癥水平。過繼轉(zhuǎn)移導(dǎo)致在這個(gè)早期時(shí)間點(diǎn)關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重程度增加，突出了CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞在易發(fā)關(guān)節(jié)炎環(huán)境中的關(guān)鍵促炎作用。其次，研究人員在具有關(guān)節(jié)炎抗性的C57BL/6近交系中使用IL-23OE，并每隔一天用抗CD200處理（OX-90）進(jìn)行干預(yù)，以阻斷駐留CD200⁺成纖維細(xì)胞對皮膚來源前體細(xì)胞的抑制。在阻斷CD200后，最初具有關(guān)節(jié)炎抗性的動物在第21天出現(xiàn)了關(guān)節(jié)炎癥，支持了CD200⁺成纖維細(xì)胞與遷移的CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞相互作用的關(guān)鍵守門作用。第三，研究人員使用局部咪喹莫特誘導(dǎo)BALB/c小鼠皮膚銀屑病，這是一個(gè)局部受限的模型，以在獨(dú)立于系統(tǒng)性IL-23OE的模型中檢驗(yàn)假設(shè)。使用該模型，研究人員在第7天觀察到關(guān)節(jié)中CD2⁺MHC-II⁺CCR2⁺髓系前體細(xì)胞增加，但CD200⁺成纖維細(xì)胞沒有減少。再次，他們每隔一天用抗CD200處理（OX-90）進(jìn)行干預(yù)，以阻斷駐留CD200⁺成纖維細(xì)胞對皮膚來源前體細(xì)胞的抑制。與第二種方法一致，在第21天，只有接受阻斷抗體的動物出現(xiàn)了關(guān)節(jié)炎癥。第四，研究人員在易感關(guān)節(jié)炎的BALB/c近交系中使用IL-23OE，并從第7天開始每5天用激動性抗CD200R1處理（OX-110）進(jìn)行干預(yù)，以恢復(fù)駐留CD200⁺成纖維細(xì)胞對皮膚來源前體細(xì)胞的抑制。在用激動性抗CD200R1治療后，第21天關(guān)節(jié)炎顯著減輕，支持了CD200介導(dǎo)的關(guān)鍵抗炎信號。

為了驗(yàn)證小鼠中的觀察結(jié)果，研究人員分析了人類單細(xì)胞RNA測序數(shù)據(jù)庫中CD2⁺MHC-II⁺CCR2