《American Journal of Hematology》：Effect of Red Blood Cell Transfusion on Inflammatory and Angiogenic Pathways in Patients With Sickle Cell Disease
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本研究前瞻性探索了鐮狀細胞病（SCD）患者接受置換輸注與補充輸注后21種血漿炎癥及血管生成蛋白的縱向動態變化。結果表明置換輸注可短暫抑制炎癥小體活化（IL-1β、IL-18）、B細胞活化（TACI/BAFFR/APRIL）、血管生成（ANGPT2/VEGFA/KDR/CXCL12）及中性粒細胞趨化（G-CSF/CXCL1/CXCL5/CXCL6）相關通路，而補充輸注主要促進血管穩定因子ANGPT1并降低EPO。研究揭示了不同輸血策略對SCD免疫微環境的差異化調控，為個體化治療提供分子依據。
ABSTRACT
鐮狀細胞病（SCD）是一種以慢性炎癥狀態為特征的遺傳性血紅蛋白病，其血漿中炎癥和血管生成蛋白水平顯著升高。雖然紅細胞（RBC）輸注在其他疾病中具有免疫調節作用，但其對SCD炎癥狀態的影響尚不明確。本研究旨在探討慢性輸血SCD患者中，RBC輸注對血漿炎癥和血管生成蛋白的縱向影響。研究納接受置換輸注（N=12）或補充輸注（N=12）的SCD患者，分別于輸注前、輸注后1小時、24–72小時、1周和2周采集血漿樣本，采用鄰位延伸分析技術檢測21種蛋白水平。結果顯示，置換輸注后1小時，炎癥小體活化相關蛋白（IL-1β、IL-18）、B細胞存活與活化蛋白（TNFRSF13B/TACI、TNFRSF13C/BAFFR、TNFSF13/APRIL）、血管生成相關蛋白（ANGPT2、VEGFA、KDR、CXCL12）以及中性粒細胞分化、招募與活化相關蛋白（G-CSF、G-CSFR、CXCL1、CXCL5、CXCL6）均顯著下降，并在輸注后2周內逐漸恢復至基線水平。相反，補充輸注后EPO和ANGPT1水平升高。研究表明，置換輸注可能通過降低HbS百分比抑制促炎和促血管生成通路，而補充輸注可能通過提升血紅蛋白水平緩解缺氧并增強血管穩定性。
1 Introduction
SCD由血紅蛋白S（HbS）聚合引發慢性溶血、微血管閉塞及缺血再灌注損傷，導致氧化應激和內皮損傷。慢性炎癥表現為中性粒細胞計數增加、活化增強，以及血漿IL-6、IL-8、IL-18等炎癥因子和ANGPT1、ANGPT2、VEGFA等血管生成因子升高。溶血產物和缺血再灌注可通過激活NLRP3炎癥小體（產生IL-1β、IL-18）和TLR4/NF-κB通路（產生IL-6）驅動炎癥反應。臨床研究顯示，IL-1β抑制劑可降低SCD患者住院頻率，提示靶向炎癥通路的治療潛力。
RBC輸注是SCD并發癥防治的重要手段，但其免疫調節效應存在爭議：一方面，輸注可能通過降低HbS比例減輕溶血和炎癥；另一方面，SCD患者血漿中結合珠蛋白和血紅素結合蛋白耗竭，輸血后溶血產物可能加劇炎癥。既往研究多聚焦短期效應，缺乏長期動態觀察。本研究通過高靈敏度PEA技術，系統分析置換輸注與補充輸注對SCD患者炎癥、血管生成、B細胞及中性粒細胞相關通路的差異化影響。
2 Materials and Methods
本研究為單中心前瞻性觀察性隊列研究，納入≥6歲、接受慢性輸血治療的SCD患者。血漿樣本于輸注前（T0）、輸注后1小時（T1）、24–72小時（T2）、1周（T3）和2周（T4）采集，使用定制化Olink Flex試劑盒檢測蛋白表達水平（NPX值）。統計學分析采用線性混合效應模型，并對多重檢驗進行校正。
3 Results
3.1 Study Population
24例患者中，置換輸注組與補充輸注組各12例，中位年齡分別為28歲和15歲。置換輸注組HbS%從輸注前44%降至輸注后15%，血紅蛋白水平無顯著變化；補充輸注組HbS%從46%降至32%，血紅蛋白從8.6 g/dL升至11 g/dL。
3.2 Cytokine Response/Inflammasome Activation
置換輸注組IL-1β、IL-10、IL-18在T1時顯著下降，IL-6在T1時短暫升高；補充輸注組無顯著變化。IL-1RN在兩組中均無統計學差異。
3.3 B Cell Survival, Differentiation and Antibody Production
置換輸注組TNFRSF13B/TACI、TNFRSF13C/BAFFR、TNFSF13/APRIL在T1時顯著降低，2周內恢復；補充輸注組僅見TNFRSF13B/C非顯著下降。
3.4 Response to Hypoxia and Angiogenesis
置換輸注組ANGPT2、VEGFA、KDR、CXCL12在T1時下降；補充輸注組ANGPT1在T1和T4時升高，EPO在T2–T3時顯著降低。
3.5 Neutrophil Activation and Recruitment
置換輸注組G-CSFR、CXCL1、CXCL5、CXCL6在T1時下降，G-CSF在T3時最低；補充輸注組無顯著變化。
3.6 Correlations Between Pre-Transfusion Protein Values and Clinical Laboratory Test Results
基線EPO與HbS%正相關，與HbA%負相關；ANGPT1與HbS%負相關，與網織紅細胞計數正相關；IL-6、IL-1RN與中性粒細胞計數正相關。
3.7 Associations Between Pre-Transfusion Protein Values and the Presence of Alloantibodies
5例患者存在紅細胞同種抗體，但基線蛋白水平與抗體狀態無顯著關聯。
4 Discussion
本研究首次通過縱向蛋白組學分析揭示置換輸注可短暫抑制SCD患者多重炎癥通路，其效應與HbS%降幅相關。置換輸注后IL-1β/IL-18下降提示炎癥小體活化受抑，而IL-6升高可能源于NF-κB通路激活，后者與輸血后溶血反應相關。B細胞活化因子（BAFF/APRIL）的降低可能減少同種免疫風險，但效應持續時間短。血管生成因子（ANGPT2/VEGFA）的短暫抑制反映缺氧緩解，而補充輸注后ANGPT1升高和EPO降低提示血管穩定性增強。中性粒細胞趨化因子（CXCL1/5/6）的快速下降支持輸血可阻斷中性粒細胞介導的血管阻塞。研究局限性包括樣本量小且未評估羥基脲的干擾。未來需探索IL-6抑制劑等聯合策略以延長輸血抗炎效應。
