每八名女性中就有一人會在其一生中患上乳腺癌，這是女性癌癥相關死亡的第二大原因。乳腺癌是一種異質性疾病，具有多種亞型，這些亞型在患者預后、生物標志物和治療選擇方面存在差異。三陰性乳腺癌（TNBC）是一種侵襲性較強的乳腺癌類型，其治療選擇較為有限。最近，該疾病獲得了美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準，可以使用抗PD1免疫療法進行治療，但預測患者治療成功的因素仍不明確。研究TNBC的一個主要障礙是缺乏具有臨床相關性的動物模型。大多數(shù)研究使用的是有限的小鼠細胞系，這些細胞系無法準確反映腫瘤的免疫逃逸機制以及人類乳腺癌的異質性。我們的實驗室開發(fā)了一種自發(fā)的TNBC模型，該模型利用CRISPR技術靶向TNBC中常見的三個突變基因：TP53、PTEN和BRCA1。通過將表達Cre蛋白的腺病毒（Ad-Cre-GFP）注入乳腺導管，該模型能夠在乳腺上皮細胞中誘導Cas9、GFP和三種CRISPR引導RNA的表達。這使得腫瘤能夠在導管內最初形成，隨后擴散到周圍的乳腺組織中，并在完全具有免疫功能的宿主體內形成異質性的、可追蹤的腫瘤。每個腫瘤在TP53、PTEN和BRCA1基因上具有獨特的突變特征，這些突變推動了腫瘤的發(fā)展和微環(huán)境的形成。由于這些腫瘤的潛伏期較長，我們還利用它們生成了二十多種與C57BL/6小鼠兼容的TNBC類似細胞系。我們通過免疫組化（IHC）分析了這些腫瘤的激素受體和細胞角蛋白表達情況，通過流式細胞術檢測了腫瘤浸潤的淋巴細胞，通過RNA測序（RNAseq）分析了基因表達譜等。我們發(fā)現(xiàn)這些細胞系具有獨特的突變特征，并且這些腫瘤在免疫學上也表現(xiàn)出多樣性：有些腫瘤中髓系細胞浸潤較多，有些則以淋巴細胞為主，還有一些腫瘤幾乎完全不受免疫系統(tǒng)的影響。通過擁有這樣一個與C57BL/6小鼠兼容的TNBC細胞系庫，我們能夠在研究中捕捉到人類乳腺癌的異質性，包括基因表達和免疫參與方面的差異。我們的細胞系庫還包括在飲食誘導的肥胖小鼠中形成的腫瘤，這為研究腫瘤生長環(huán)境對免疫浸潤、免疫原性和突變負擔的影響提供了新的見解�？傮w而言，我們不僅在C57BL/6小鼠中建立了自發(fā)的TNBC模型，還構建了高度多樣化的TNBC可植入細胞系，這將有助于更準確地模擬人類乳腺癌在小鼠體內的表現(xiàn)。未來，我們將能夠研究這些不同腫瘤系對免疫療法的反應，并利用它們來更好地理解影響患者免疫療法療效的因素。