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通過三級混合隨機突變技術產生的銅綠假單胞菌突變體過度產生了糖脂肽生物兩親體
《BMC Microbiology》:Overproduction of glycolipopeptide bio-amphiphile by Pseudomonas aeruginosa mutant generated through three-tier cocktail random mutagenesis
【字體: 大 中 小 】 時間:2026年02月24日 來源:BMC Microbiology 4.2
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隨機誘變聯合γ射線及N-甲基-N'-亞硝基-N-亞硝胍處理增強銅綠假單胞菌IKW1產甘油脂肽能力,代謝途徑受阻導致蘇氨酸異亮氨酸分支阻斷。5升生物反應器優化發酵后溶氧系數提升24%,甘油脂肽產量增長3.86倍。該產物表面張力降至24.41 dyn/cm,原油降解速率常數0.115 d?1,優于商業表面活性劑。該技術適用于原油污染生態系統生物修復。
本研究采用了一種強大的三重隨機突變技術,結合了大氣壓和室溫等離子體、伽馬射線以及N-甲基-N’-硝基-N-硝基胍(N-Methyl-N’-Nitro-N-Nitrosoguanidine)處理方法,以誘導銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)IKW1菌株(GenBank登錄號:PV664482.1)產生過多的糖脂肽。生理活性分析表明,在該突變菌株Thr^-Ile^-PGN4中,天冬氨酸代謝途徑中的蘇氨酸和異亮氨酸分支發生了未修復的代謝阻塞。糖脂肽的過量產生與尿素酶活性的增加、Ni^2+的吸收、胞質中Ni^2+的富集以及組氨酸生物合成的上調顯著相關。通過在5升生物反應器中使用改良的優化培養基進行批量發酵,體積氧轉移系數(kLa)提高了1.24倍,氧氣吸收速率(OUR)達到18.6 mmol O2 gDCW^-1 h^-1,從而使糖脂肽的產量提高了3.86倍。定期進行的生化分析和薄層色譜分析顯示,該糖脂肽是一種具有表面活性的物質,其表面張力(SFT)和界面張力(IFT)分別降至29.74 dynes cm^-1和2.22 dynes cm^-1。隨后發生的特異性肽化反應進一步將SFT和IFT降至24.41 dynes cm^-1和0.87 dynes cm^-1。兒茶酚1,2-雙加氧酶(catechol 1,2-dioxygenase)的優異催化作用促進了銅綠假單胞菌ATCC 49,182菌株對原油的降解,其降解速率常數分別為:使用糖脂肽時為0.115 d^-1,使用雙-rhamnolipid時為0.087 d^-1,使用surfactin時為0.096 d^-1,而不使用表面活性劑時為0.065 d^-1。該技術被認為適用于可持續生產糖脂肽,有助于有效修復受原油污染的生態系統。
本研究采用了一種強大的三重隨機突變技術,結合了大氣壓和室溫等離子體、伽馬射線以及N-甲基-N’-硝基-N-硝基胍(N-Methyl-N’-Nitro-N-Nitrosoguanidine)處理方法,以誘導銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)IKW1菌株(GenBank登錄號:PV664482.1)產生過多的糖脂肽。生理活性分析表明,在該突變菌株Thr^-Ile^-PGN4中,天冬氨酸代謝途徑中的蘇氨酸和異亮氨酸分支發生了未修復的代謝阻塞。糖脂肽的過量產生與尿素酶活性的增加、Ni^2+的吸收、胞質中Ni^2+的富集以及組氨酸生物合成的上調顯著相關。通過在5升生物反應器中使用改良的優化培養基進行批量發酵,體積氧轉移系數(kLa)提高了1.24倍,氧氣吸收速率(OUR)達到18.6 mmol O2 gDCW^-1 h^-1,從而使糖脂肽的產量提高了3.86倍。定期進行的生化分析和薄層色譜分析顯示,該糖脂肽是一種具有表面活性的物質,其表面張力(SFT)和界面張力(IFT)分別降至29.74 dynes cm^-1和2.22 dynes cm^-1。隨后發生的特異性肽化反應進一步將SFT和IFT降至24.41 dynes cm^-1和0.87 dynes cm^-1。兒茶酚1,2-雙加氧酶(catechol 1,2-dioxygenase)的優異催化作用促進了銅綠假單胞菌ATCC 49,182菌株對原油的降解,其降解速率常數分別為:使用糖脂肽時為0.115 d^-1,使用雙-rhamnolipid時為0.087 d^-1,使用surfactin時為0.096 d^-1,而不使用表面活性劑時為0.065 d^-1。該技術被認為適用于可持續生產糖脂肽,有助于有效修復受原油污染的生態系統。