《Cancer Immunology, Immunotherapy》：Microwave ablation combined with dendritic cells enhances CD8+ T cell activation in rechallenged tumor mouse model
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為解決非小細胞肺癌微波消融后局部復發率高、樹突狀細胞功能失調限制有效T細胞應答的問題，本研究在Lewis肺癌再激發小鼠模型中評估了微波消融聯合DC療法的療效。結果顯示，聯合治療顯著抑制了腫瘤復發，增強了再激發腫瘤及腫瘤引流淋巴結中CD8+T細胞的比例和功能，并大幅提升了腫瘤引流淋巴結中遷移性1型常規樹突狀細胞的頻率與免疫刺激能力。此項研究揭示了MWA聯合DC療法通過激活cDC1s并增強CD8+T細胞功能的協同抗腫瘤機制，為減少消融后腫瘤復發提供了有前景的策略。
肺癌，尤其是非小細胞肺癌，是全球發病率和癌癥相關死亡率的主要驅動者，是現代醫學面臨的嚴峻挑戰。對于局部治療，除了手術和立體定向消融放療，圖像引導熱消融已成為可行的治療方式。其中，微波消融因其安全性和有效性在非小細胞肺癌患者中顯示出良好前景。然而，局部復發仍然是損害患者長期生存的主要問題，尋找降低復發風險的聯合療法成為迫切需求。
免疫腫瘤學作為癌癥研究和臨床實踐的一個創新領域，旨在幫助患者的免疫系統對抗癌癥。然而，腫瘤免疫抑制微環境中樹突狀細胞的功能障礙是限制有效T細胞介導的抗腫瘤反應的關鍵因素。樹突狀細胞是最強大的抗原呈遞細胞，連接先天性和適應性免疫，其中，cDC1（常規樹突狀細胞1型）通過在腫瘤微環境中吞噬和處理腫瘤相關抗原，遷移至腫瘤引流淋巴結，通過主要組織相容性復合體（MHC）-I將抗原交叉呈遞給CD8+T細胞，在抗腫瘤免疫中發揮核心作用。微波消融可以誘導腫瘤細胞免疫原性死亡，釋放損傷相關分子模式和腫瘤相關抗原，從而可能激活樹突狀細胞的功能�；诖耍芯咳藛T提出了一個科學假設：將微波消融與DC療法結合，可能克服DC功能障礙，增強抗腫瘤療效，從而減少消融后的腫瘤復發。
為了驗證這一假設，研究人員在《Cancer Immunology, Immunotherapy》上發表了一項研究。他們利用了多種關鍵技術方法開展研究。首先，研究使用了C57BL/6小鼠構建的Lewis肺癌再激發模型來模擬臨床消融后的腫瘤復發場景。其次，利用Flt3配體在體外從小鼠骨髓細胞誘導生成了樹突狀細胞（FL-DCs）。關鍵的實驗技術包括：使用流式細胞術全面分析腫瘤和腫瘤引流淋巴結中的免疫細胞景觀；采用小動物活體光學成像系統監測腫瘤的生長；通過磁珠分選技術分離特定的細胞亞群（如CD24+cDC1s）；以及利用蘇木精-伊紅染色評估治療對主要器官的安全性。
研究結果
MWA combined with DC therapy significantly reduces tumor recurrence after ablation in the LLC tumor rechallenge model
研究人員建立了LLC腫瘤再激發小鼠模型。生存分析顯示，接受聯合治療的小鼠實現了長期生存。與單獨治療組相比，聯合治療組的小鼠對再激發腫瘤的生長和可見腫瘤負荷的控制顯著更優。體內成像也證實聯合治療組的腫瘤尺寸顯著減小。此外，小鼠體重監測和主要器官（心、肝、肺、腎）的組織學檢查均未發現顯著毒性或病理變化，表明聯合治療具有良好的安全性。
Synergistic effect of MWA and DC therapy on enhancing CD8+T cell proportion and function in tumors and TdLNs
流式細胞術分析發現，聯合治療組中，再激發腫瘤和腫瘤引流淋巴結內的CD8+T細胞比例均有所增加，且在腫瘤引流淋巴結中效果更顯著。同時，聯合治療顯著提升了腫瘤和腫瘤引流淋巴結中具有活性和產生干擾素-γ（IFN-γ）能力的CD8+CD44+IFN-γ+T細胞的比例。進一步分析顯示，腫瘤引流淋巴結中效應記憶T細胞和中央記憶T細胞的比例也在聯合治療組中顯著升高。
The combinational therapy significantly increases the proportion of cDCs or cDC1s and enhances the function of Mig cDC1s
分析發現，聯合治療顯著增加了再激發腫瘤中cDCs及其亞型cDC1s的比例。在腫瘤引流淋巴結中，聯合治療提高了駐留型cDCs和遷移型cDCs的比例，其中遷移型cDCs增加更為明顯，且主要是CD24+遷移性cDC1s的增加。功能分析表明，聯合治療后，遷移性cDC1s表面共刺激分子（CD80、CD86）和抗原呈遞分子（MHC-I、MHC-II）的表達均顯著上調，表明其免疫刺激能力增強。
Supplementation of cDC1s exhibits superior anti-tumor efficacy
為了闡明cDC1s的關鍵作用，研究人員在MWA治療后回輸了分選出的CD24+cDC1s。結果顯示，MWA聯合cDC1s治療比MWA聯合未分選的DCs更能抑制再激發腫瘤的生長，部分小鼠甚至完全抑制了腫瘤生長，表明cDC1s是介導聯合治療效果的關鍵DC亞型。
cDC1 supplementation enhanced CD8+T cell expansion and function in rechallenged tumors
與上述發現一致，回輸cDC1s聯合MWA治療進一步增強了再激發腫瘤中CD8+T細胞的比例和其產生IFN-γ的功能。
cDC1 supplementation enhanced Mig cDC1s expansion and function in TdLNs compared to DC-based combination therapy
回輸cDC1s聯合治療，進一步提高了腫瘤引流淋巴結中遷移性cDC1s的比例，并增強了其表面功能分子的表達，形成了正反饋循環，放大了抗腫瘤免疫反應。
研究結論與討論
本研究首次在LLC腫瘤再激發模型中證實，微波消融聯合DC療法能顯著抑制消融后腫瘤復發，并表現出強大的免疫促進作用。其核心機制在于：聯合治療顯著提升了再激發腫瘤和腫瘤引流淋巴結中CD8+T細胞的增殖、活化與功能（如產生IFN-γ），并增加了中央記憶和效應記憶T細胞亞群。更重要的是，研究發現聯合治療大幅提高了腫瘤引流淋巴結中遷移性cDC1s（CD24+Mig cDC1s）的頻率，并增強了其抗原呈遞和共刺激能力（表現為CD80、CD86、MHC-I、MHC-II分子表達上調）。特異性回輸cDC1s的實驗進一步證明，cDC1s是介導該聯合療法抗腫瘤免疫效應的關鍵細胞亞型。研究人員討論指出，DC特別是cDC1s，通過捕獲MWA釋放的腫瘤抗原并遷移至引流淋巴結，有效激活CD8+T細胞，是啟動抗腫瘤免疫循環的核心。本研究的發現不僅揭示了MWA聯合DC療法通過激活cDC1s—CD8+T細胞軸發揮協同抗腫瘤作用的機制，而且為臨床上減少微波消融后腫瘤復發、改善非小細胞肺癌患者預后提供了一種極具潛力的聯合免疫治療策略，奠定了將其轉化為臨床應用的實驗基礎。
