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        綜述:反硝化厭氧甲烷氧化技術的進展:對相關生理機制和代謝過程的最新認識

        《Bioresource Technology》:Advances in denitrifying anaerobic methane Oxidation: Emerging insights into the physiology and metabolism

        【字體: 時間:2026年02月25日 來源:Bioresource Technology 9

        編輯推薦:

          DAMO微生物通過甲烷氧化與硝酸鹽/亞硝酸鹽還原的耦合作用,實現氮碳循環的協同調控,其代謝多樣性及經典協同理論被修正,揭示細菌(如Ca. M. sinica)可獨立完成反硝化,古菌(如Ca. M. nitroreducens)發展反向甲烷生成及電子傳遞策略,大質粒(Borgs)顯著擴展宿主代謝功能,為低碳污染控制提供新范式。

          
        朗瑞燕|郝玉然|郭明宇|李偉斌|張月|唐彥杰|柴鳳光|劉盼盼|李順義|李琳
        鄭州大學生態與環境學院,中國鄭州450001

        摘要

        反硝化厭氧甲烷氧化(DAMO)是一種獨特的微生物過程,在該過程中,甲烷(CH4)作為電子供體用于硝酸鹽(NO3-)或亞硝酸鹽(NO2-)的還原,從而在氮-碳循環中發揮作用。本文綜述了最近的研究進展,這些進展修正了人們對DAMO微生物的傳統認識。DAMO細菌具有多樣的氮代謝能力,包括細胞內氧氣生成、完全反硝化以及通過協同作用參與一氧化二氮(N2O)的產生和還原。對于DAMO古菌,我們回顧了反向甲烷生成途徑,并強調了新興的代謝策略,如細胞外電子轉移(EET)、異化硝酸鹽還原為銨(DNRA)和乙酸產生。此外,我們還討論了大型染色體外遺傳元件(ECEs),包括Borgs和mini-Borgs,在擴展宿主與CH4氧化、電子傳輸和氮代謝相關功能中的作用。本文全面揭示了DAMO微生物的多樣生理特性和靈活的代謝機制。

        引言

        甲烷(CH4)是一種主要的溫室氣體,其全球變暖潛力僅次于二氧化碳(CO2)。其20年的全球變暖潛力約為CO2的84倍(Brown等人,2023年)。在自然和人工生態系統中,甲烷的厭氧生物轉化是維持生態系統穩定和減少溫室氣體排放的關鍵機制(Kroeger等人,2020年)。DAMO利用CH4和NO3-/NO2-作為電子供體和受體,同時實現CH4的還原和氮的去除。這種獨特的代謝途徑將厭氧碳循環和氮循環聯系起來(Raghoebarsing等人,2006年)。自發現以來,DAMO已成為微生物生態學、生物地球化學和環境工程交叉領域的前沿課題,為低碳污染控制和氣候變化緩解提供了新的范例。
        經典的理論認為DAMO過程涉及兩種不同功能微生物的協同代謝:一種是由NC10門細菌組成,模式物種為Candidatus Methylomirabilis oxyfera(Ca. M. oxyfera)(Ettwig等人,2008年)。其基因組編碼了完整的顆粒狀甲烷單加氧酶(pMMO)及其下游代謝途徑。通過一氧化氮(NO)的歧化(2NO → N2 + O2),它在細胞內生成氧氣,使CH4能夠“內源性有氧氧化”,同時將NO2-還原為氮氣(N2)(Echeveste Medrano等人,2025年)。另一種是由ANME-2d古菌組成,代表物種為Candidatus Methanoperedens nitroreducens(Ca. M. nitroreducens)(Haroon等人,2013年)。這種古菌通過反向甲烷生成途徑氧化CH4,并利用硝酸鹽還原酶(NarGHI)將NO3-還原為NO2-;然而,它缺乏NO2-還原所需的基因,因此必須與NC10細菌形成“兩步”協同代謝。古菌提供NO2-,而細菌完成后續的還原和CH4氧化,從而避免NO2-積累造成的毒性抑制(Echeveste Medrano等人,2024年)。這一傳統理解長期以來主導了DAMO的基礎研究和應用探索。
        隨著宏基因組學-轉錄組學整合、靶向富集培養和反應器工程技術的突破,DAMO領域的研究進展已經遠遠超越了經典理論的界限。在微生物代謝水平上,來自NC10細菌的Candidatus Methylomirabilis sinica(Ca. M. sinica)已被證實能夠獨立完成從NO3-到N2的完整反硝化過程(Yao等人,2024年),推翻了“兩步”代謝模型。DAMO細菌并不像傳統認為的那樣完全不產生N2O(Tan等人,2023年)。NO2-濃度閾值會觸發NorZ基因的表達,從而通過NO?→?N2O轉化來避免有毒中間產物的積累,形成“應激分流機制”。然而,N2O的最終還原依賴于與Methyloversatilis等協同微生物的相互作用(Lv等人,2024年;Tan等人,2023年),這突顯了其在溫室氣體調節中的復雜作用。ANME-2d古菌演化出了專門的代謝策略,如乙酸產生和DNRA(Wang等人,2025年)以及EET。它們還可以與硫酸鹽還原細菌(SRB)合作,完成依賴硫酸鹽的CH4氧化,從而連接碳、氮和硫循環(Nie等人,2021年;Wei等人,2022年)。特別重要的是在ANME-2d古菌中發現的ECEs,包括巨大的線性Borgs和小型mini-Borgs(Al-Shayeb等人,2022年;Shi等人,2024年)。這些元件攜帶與CH4氧化和電子轉移相關的基因,顯著增強了宿主的適應能力。生態位分化塑造了DAMO微生物的獨特生理特征。這種分化的核心驅動因素包括NO2-濃度(Ca. M. oxyfera適應低濃度,而Ca. M. sinica適應高濃度)和溶解氧(DO)水平。這種分化使細菌更傾向于占據過渡性生態位,而古菌則局限于穩定的厭氧微環境。DAMO古菌和細菌在氧氣耐受性和生態位分化方面的差異構成了它們在自然和人工環境中的核心分工基礎。盡管這些現象在不同研究中分別被報道,但尚未被整合到一個系統的認知框架中。目前的綜述大多關注單一微生物群體或特定代謝途徑,缺乏對DAMO微生物多維適應策略的總體解釋。
        因此,本文系統地總結了DAMO細菌和古菌的核心生理功能,強調了DAMO細菌多樣的氮轉化途徑,以及EET、產酸代謝和染色體外元件(如Borgs)在DAMO古菌中的功能作用。同時討論了未來的研究需求和方向,旨在加深對DAMO微生物生理和代謝多樣性的理解。

        部分內容摘錄

        利用NO2-作為電子受體的細胞內氧氣生成過程

        Ca. M. oxyfera的“內需氧”途徑(Ettwig等人,2010年)是其最顯著的代謝特征,這一特征從根本上顛覆了人們對厭氧微生物代謝的傳統理解。該途徑的新穎之處在于,CH4氧化所需的分子氧氣(O2)并非來自環境,而是在細胞內通過氮代謝過程生成的(Wu等人,2011年)。盡管該途徑存在于厭氧環境中,但其基因組仍然

        DAMO古菌中的反向甲烷生成途徑

        關于厭氧甲烷氧化(AOM)的傳統研究主要集中在海洋生態系統中的ANME群體與SRB之間的共生代謝模型(Wang等人,2023年)。人們認為ANME群體依賴共生微生物來轉換電子受體或進行電子轉移以實現高效的CH4氧化。然而,Ca. M. nitroreducens這種ANME-2d群體的代表菌株以獨特的方式定殖于淡水沉積物和廢水處理系統中,并且可以

        DAMO微生物的生態位分化

        電子供體和受體的類型是決定微生物群落特征的基本因素。此外,底物濃度和溶解氧(DO)是影響微生物生理功能和生態位分化的主要因素。例如,NO2-濃度可能導致Ca. M. oxyfera和Ca. M. sinica之間的分化,而NO3-和CH4不足的條件可能刺激DAMO古菌產生乙酸。相反,在

        研究需求和未來方向

        DAMO微生物在通過將CH4氧化與NO3-/NO2-還原相結合來減少廢水中的氮和溫室氣體方面展現出巨大潛力。這種代謝能力為低碳污染控制策略提供了理論和技術上的機遇。在主流和旁路處理場景中,厭氧銨氧化(Anammox)的高反硝化效率和低污泥產生可以通過DAMO古菌在溶解氧中的功能得到增強

        結論

        DAMO微生物表現出高度的代謝多樣性和可塑性。NC10細菌通過生成細胞內氧氣克服了熱力學限制;Ca. M. sinica可以利用NO3-進行完全反硝化,并擴大底物譜。NC10細菌能夠內在產生N2O,而NO2-濃度是其代謝途徑的關鍵調節因子。它們與共生伙伴協同還原N2O。ANME-2d古菌通過反向甲烷生成途徑運作

        未引用的參考文獻

        Medrano和Maider Junkal,2024年;Li等人,2025年;Niu等人,2024年;Shen等人,2020年。

        CRediT作者貢獻聲明

        朗瑞燕:撰寫——初稿,調查,正式分析。郝玉然:正式分析。郭明宇:撰寫——初稿。李偉斌:可視化,驗證。張月:驗證,軟件。唐彥杰:監督,軟件。柴鳳光:監督,數據管理。劉盼盼:監督。李順義:項目管理,概念化。李琳:撰寫——審稿與編輯,資源管理,概念化。

        利益沖突聲明

        作者聲明他們沒有已知的競爭性財務利益或個人關系可能影響本文所述的工作。

        致謝

        本工作得到了國家自然科學基金(項目編號:52300068)、中國博士后科學基金(項目編號:2024M762997)以及河南省關鍵專項研發突破計劃(項目編號:242102320089)的財政支持。
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