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        介電屏障放電冷等離子體與EGCG對產氣莢膜梭菌孢子滅活作用及鹽烤雞肉品質變化的影響

        《Food Control》:Effects of dielectric barrier discharge cold plasma and EGCG on inactivation of Clostridium perfringens spores and quality changes of salt-baked chicken

        【字體: 時間:2026年02月27日 來源:Food Control 6.3

        編輯推薦:

          冷等離子體(CP)與EGCG協同處理可顯著滅活鹽焗雞肉中的志賀氏菌孢子,降低其熱抗性,并延緩脂質氧化,延長保質期。摘要:本研究評估了CP和EGCG單獨及聯合處理對鹽焗雞肉中C. perfringens孢子的滅活效果及食品品質影響。結果表明,CP在90 kV/600 s處理下使孢子熱抗性比降至0.5%,且與EGCG聯用可更有效抑制揮發性基本氮(TVB-N)和脂質氧化。

          
        王月|林一琳|李曉晴|劉勝鵬|李秀華|于逸剛
        華南理工大學食品科學與工程學院,中國廣州510641

        摘要

        產孢微生物對食品安全和防腐敗具有重大挑戰。本研究探討了介質阻擋放電冷等離子體(CP)和表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)對產氣莢膜梭菌孢子滅活以及鹽烤雞肉在36天儲存期間品質變化的影響。根據電壓和時間的不同,CP處理使孢子和總活菌數分別減少了0.01至0.90 log CFU g-1和0.28至1.91 log CFU g-1。經過CP處理的孢子在80°C下處理10分鐘后,其耐熱性顯著降低。在90 kV/600秒的CP處理后,鹽烤雞肉中的孢子耐熱性比最低降至0.5%。吡啶-2,6-二羧酸的釋放和共聚焦激光掃描顯微鏡觀察表明,CP誘導的耐熱性降低與孢子萌發和結構損傷有關。CP、EGCG以及EGCG + CP處理延長了微生物的保質期,并抑制了鹽烤雞肉在儲存過程中總揮發性堿性氮含量的增加。與單獨使用CP或EGCG處理相比,EGCG + CP聯合應用在延緩脂質氧化方面表現出更好的效果。這些結果為將CP作為控制產氣莢膜梭菌孢子和保持熟肉制品品質的非熱處理策略提供了科學依據。

        引言

        產氣莢膜梭菌是一種革蘭氏陽性、厭氧、產孢細菌,廣泛存在于土壤、污水系統以及溫血動物的腸道中(Hassan, Elbourne, Tetu, Melville, Rood, & Paulsen, 2015)。產氣莢膜梭菌會產生超過20種毒素,其中腸毒素和β毒素是導致食物中毒、壞死性腸炎和致命感染的主要原因(Gohari, Navarro, Li, Shrestha, Uzal, & McClane, 2021; Heida, et al., 2016)。據估計,在美國,產氣莢膜梭菌每年導致約一百萬例食源性疾病,其中肉制品是主要的傳播媒介(Park, Park, & Yoon, 2014; Scallan, et al., 2011)。由于具有多層外結構,產氣莢膜梭菌的內孢子能夠在營養耗盡、巴氏殺菌溫度、低pH值和高壓等極端條件下存活并保持休眠狀態(Georget, et al., 2015; Paredes-Sabja, Sarker, Setlow, Setlow, & Sarker, 2008)。當環境條件適宜時,這些孢子會萌發成營養細胞并迅速繁殖。盡管超高溫是目前最有效的商業孢子滅菌方法,但它不可避免地會損害食品的營養價值和感官特性(Barbosa-Cánovas, Medina-Meza, Candogan, & Bermúdez-Aguirre, 2014; Cebrián, Condón, & Ma?as, 2017)。因此,迫切需要開發溫和而有效的替代策略來控制熟肉制品中的產氣莢膜梭菌孢子。
        目前用于非熱滅活細菌孢子的方法主要分為兩類:物理處理(包括超聲波、電場和化學物質)(Liang, et al., 2024; T. T. Lin, Bian, Sun, Wang, Liu, & Wang, 2022; L. H. Wang, Pyatkovskyy, Yousef, Zeng, & Sastry, 2020)和萌發抑制策略。在后者中,首先誘導耐熱孢子萌發,這一過程在不同物種和菌株之間存在差異。然后在它們更敏感的營養狀態下將其滅活(Lyu, et al., 2023; Sarker, Akhtar, Torres, & Paredes-Sabja, 2015)。因此,進一步了解產氣莢膜梭菌的獨特萌發機制和途徑對于開發針對性的商業滅菌方法至關重要。高壓(HHP)是一種成熟的溫和處理技術,能夠誘導大多數細菌物種的孢子萌發,但它對梭菌目菌株的孢子萌發效果較差(Akhtar, Paredes-Sabja, Torres, & Sarker, 2009; Kim, Shahbaz, Cho, Lee, & Park, 2021)。雖然已經開發了如壓力循環和HHP輔助熱處理等組合策略來克服這一問題,但HHP的高設備成本、批次操作模式和有限的食品適用性限制了其在食品滅菌中的廣泛應用(Evelyn & Silva, 2016; Fekraoui, et al., 2021)。
        作為一種新興技術,大氣介質阻擋放電冷等離子體(DBD-CP)因其非熱處理、快速進展、經濟高效以及可集成到連續生產中的優勢而被提出用于孢子滅活(Bourke, Ziuzina, Boehm, Cullen, & Keener, 2018; Nasiru, et al., 2021)。CP的殺菌效果主要依賴于等離子體激活過程中產生的大量活性氧和氮物種(ROS/RNS)(Deng, Shi, & Kong, 2006; Sarangapani, Patange, Bourke, Keener, & Cullen, 2018)。次要機制還包括紫外線(UV)輻射、帶電粒子和蝕刻效應(Lopes, Mota, Gomes, Delgadillo, & Saraiva, 2018; Mandal, Singh, & Singh, 2018)。這些因素共同作用會損害孢子的內膜和關鍵萌發相關蛋白,最終導致孢子滅活(Liao, et al., 2019; S. W. Wang, Doona, Setlow, & Li, 2016)。Tseng, Abramzon, Jackson, & Lin(2012)報告稱,使用氦氣作為載體氣體進行大氣CP處理時,產氣莢膜梭菌 ATCC 3624孢子在聚苯乙烯微板中的D值為2.66分鐘。然而,目前尚不清楚CP誘導的損傷是否會導致孢子萌發。為了探索協同效應并盡量減少CP對食品基質物理化學和感官品質的潛在不利影響,引入了表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)作為天然輔助劑。EGCG是一種主要存在于茶葉中的多酚類次生代謝物,其特征是含有酯鍵連接的沒食子酰基(S. Wang, Wang, Li, Zhang, & Chen, 2025)。作為食品保存中的生物活性成分之一,EGCG的抗氧化能力和廣譜抗菌活性歸因于其多酚成分的高反應性(Y. L. Lin, et al., 2024; Y. L. Lin, Xuan, Fabrice, Yu, Huang, & Zhang, 2025; S. Wang, et al., 2025)。
        本研究的目的是探討CP和EGCG處理對產氣莢膜梭菌孢子的影響,并優化鹽烤雞肉基質中的關鍵參數。通過計數孢子、評估耐熱性變化以及測定吡啶-2,6-二羧酸(DPA)的釋放來評估滅活效果。通過顯微鏡觀察和確認了類似孢子萌發的反應。為了評估載體基質對CP和EGCG抗菌活性的影響,分別在鹽烤雞肉(一種模型食品系統)和PBS溶液中接種了產氣莢膜梭菌孢子,并在處理后進行了計數。最后,還分析了鹽烤雞肉在儲存過程中經過CP和EGCG處理后的化學性質和感官品質的變化。

        材料與試劑

        真空包裝的即食鹽烤雞肉購自中國廣州的Likoufu食品有限公司。食品級EGCG購自中國武漢的Guanwin生物技術有限公司。產氣莢膜梭菌 CICC24751菌株來自中國工業微生物菌種保藏中心。磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)粉末購自中國北京的Labgic科技有限公司。其他化學品購自Aladdin生化公司

        CP、EGCG和熱處理對產氣莢膜梭菌孢子滅活效率的影響

        通過測量鹽烤雞肉基質中的總孢子數量來量化CP處理對產氣莢膜梭菌孢子滅活的效果。如圖1A所示,從0到90 kV處理300秒后,孢子未發生顯著滅活(p > 0.05)。當電壓升高到110 kV和130 kV時,孢子數量分別減少了0.46和0.90 log CFU g-1(p < 0.05)。雖然即食肉制品中產氣莢膜梭菌孢子的商業滅菌通常需要

        結論

        本研究表明,提高CP的放電電壓和處理時間可以減少鹽烤雞肉中的總活菌數和孢子數量。當CP與溫和的熱處理結合使用時,孢子滅活效率提高,在90 kV下處理600秒后,孢子的耐熱性比最低降至0.5%。這種耐熱性的顯著增強可能與CP誘導的孢子休眠狀態喪失有關,這一點通過DPA釋放等間接指標得到了證實

        CRediT作者貢獻聲明

        劉勝鵬:驗證、軟件、數據管理。李曉晴:撰寫 – 審稿與編輯、可視化、資源管理、數據分析。李秀華:撰寫 – 審稿與編輯、監督、資源管理、數據分析、概念構思。于逸剛:監督、資源管理、項目管理、方法學、資金獲取、數據分析、概念構思。林一琳:撰寫 – 審稿與編輯、監督、軟件管理、方法學、數據管理。王月:撰寫 – 審稿與編輯

        利益沖突聲明

        ? 作者聲明以下可能被視為潛在利益沖突的財務利益/個人關系:于逸剛擁有華南理工大學的專利。如果還有其他作者,他們聲明沒有已知的可能影響本文研究的財務利益或個人關系。

        致謝

        本研究得到了廣東省重點領域研發項目(2025B0202130003)和廣東省農業農村發展廳農業研究和技術推廣示范項目(2024年,項目編號2023-440000-58010200-9645)的支持。同時,也非常感謝華南理工大學的測試中心提供的檢測服務。
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