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        通過酶法水解磷酸二淀粉,并通過交聯肌原纖維蛋白,可以提高高壓滅菌豬肉的質地強度

        《Food Hydrocolloids》:Enzymatically hydrolyzed distarch phosphate improves of textural strength of autoclaved pork via cross-linking myofibrillar protein

        【字體: 時間:2026年02月27日 來源:Food Hydrocolloids 12.4

        編輯推薦:

          HDSP通過DPOS增強豬肉熱穩定性及質構,其共價交聯在美拉德反應早中期形成,提升持水性和機械強度,驗證DPOS為關鍵功能成分。

          
        郝文輝|楊尚菊|肖瑤|王曉靜|袁奕軒|孫迅
        中國海洋大學食品科學與工程學院,青島 266404,中國

        摘要:

        豬肉是全球廣泛消費的肉類,其肌原纖維蛋白(MP)占總蛋白質的50-65%。高壓滅菌是許多豬肉產品制造過程中的核心步驟,但這一過程常常會導致蛋白質水凝膠的質量下降,從而降低最終產品的感官品質和商業價值。本研究證明,經過酶法水解的磷酸二淀粉(HDSP)能夠提高豬肉在高壓滅菌過程中的質地強度。系統研究表明,HDSP中的主要功能性成分是二磷酸化寡糖(DPOS)。研究發現,HDSP中DPOS的比例越高,豬肉的熱穩定性和保水能力就越強。豬肉MP凝膠化模型表明,HDSP的交聯作用發生在美拉德反應的早期至中期階段,從而形成具有更好保水性、機械強度和更緊密微觀結構的蛋白質水凝膠。最后,SDS-PAGE分析證實了肌球蛋白重鏈(MHC)之間的分子間交聯,形成了高分子量聚集體,以及涉及肌動蛋白和肌動蛋白原的三聚體復合物,證明了HDSP的共價交聯能力。這項研究進一步證明了DPOS作為HDSP中關鍵交聯成分的作用,它通過共價鍵合穩定了基于MP的水凝膠系統。這些發現不僅拓寬了HDSP的應用前景,還為改善富含蛋白質的食品的質地提供了新的蛋白質修飾策略。

        引言

        豬肉是全球消費最廣泛的肉類之一,高壓滅菌是常用的商業殺菌技術(Sionkowska等人,2026年)。然而,熱處理會對豬肉產品產生一系列不利影響,尤其是質地變差,表現為多汁性和彈性降低,從而影響最終產品的商業價值(Chai, Zhang, Zhao, & Xu, 2025年)。盡管新興的非熱處理技術(如高壓靜水壓(HHP)、超聲波和脈沖電場(PEF)在提高彈性和控制微生物方面顯示出潛力(Hong, Shim, Choi, & Min, 2008年;Jia, Sha, Meng, & Liu, 2019年),但高壓滅菌仍然是最常用的方法,并獲得了聯合國糧食及農業組織(FAO)和歐洲食品安全局(EFSA)的認可,用于食品的商業殺菌和烹飪(Huang等人,2024年)。
        肌原纖維蛋白(MP)占總蛋白質含量的50-65%(He等人,2025年)。MP的含量和結構變化顯著影響豬肉產品的質地特性、感官屬性和保水能力(WHC)(Li等人,2025年;Sun等人,2025年)。先前的研究表明,熱處理過程中MP的降解會導致肌肉纖維收縮,進而引發一系列變化,包括肌肉纖維收縮、蛋白質結合力減弱后自由水的重新分布,以及MP的彈性和保水能力下降,這些都會直接影響最終產品的質量(Li等人,2025年;Yang, Xu, Wang, Ji, & Shen, 2025年;Yu等人,2021年)。因此,減輕熱處理過程中MP的降解對于優化肉制品的彈性和質地至關重要。
        交聯是一種通過共價鍵和/或離子相互作用形成較大蛋白質聚合物的過程,被認為是提高熱處理后蛋白質水凝膠穩定性的常用策略(Sionkowska, Skopinska-Wisniewska, Gawron, Kozlowska, & Planecka, 2010年)。酶法交聯系統(如轉谷氨酰胺酶、多酚氧化酶和過氧化物酶)已在分散系統中取得成功。然而,由于酶是大分子,具有較高的空間障礙,其在大塊材料(如整塊豬肉)中的應用受到滲透性差的限制(Lerner, Benzvi, & Vojdani, 2024年;Li等人,2020年;Shen & Wang, 2024年)。為了解決擴散相關問題,小分子交聯劑越來越受到研究關注。例如,辛烯基琥珀酸酐(> 4 g/kg)已被證明可以通過調節疏水相互作用來減輕高溫引起的肌原纖維蛋白凝膠的質地劣化(Chen等人,2023年),但該化合物存在安全性問題(LD50為2000mg/kg)(Winder, Azzi, & Wagner, 2005年)。同樣,戊二醛也被證明是一種有效的交聯劑,但其毒性(LD50 = 100 mg/kg)限制了其在食品中的應用范圍(Ballantyne & Myers, 2001年;Zimmer & McKinley, 2008年)。單寧酸廣泛存在于植物性食品中,可以通過非共價和共價相互作用抑制凝膠的熱誘導質地劣化,但其強烈的收斂味限制了其在肉制品中的應用(Zhao等人,2024年)。
        為了開發“無毒的戊二醛”,我們團隊近年來發現,含有兩個或多個還原末端(半縮醛形式的醛基)的改性碳水化合物(如氧化肌醇、二醛淀粉和二醛半乳糖)可以共價交聯海參(Cao, Liu, Zhi, Liu等人,2023年;Cao, Liu, Zhi, Jing等人,2023年;Liu等人,2024年;Yu等人,2024年)。然而,這些化合物尚未經過系統的安全性評估,也未被批準作為商業食品添加劑。
        磷酸二淀粉(HDSP)是通過用淀粉酶深度水解磷酸二淀粉(DSP,一種獲得FAO和WHO認證的食品添加劑)制備的(Mortensen等人,2017年;Yeo, Woo, & Seib, 2002年)。我們團隊證實,HDSP可以顯著提高海參和對蝦等水產品的保水能力和質地強度,這可能是通過交聯機制實現的。作為一種新型改性淀粉,HDSP沒有異味,對底物的味道也沒有負面影響(Yu等人,2024年;Yu等人,2025年)。盡管HDSP尚未正式被批準為食品添加劑,但它已經在食品生產中使用,因此預計是安全的。這是因為在制備DSP(HDSP的前體)的過程中,通常會使用淀粉酶來調整產品性能,而這一過程也會產生HDSP。
        基于上述優勢,HDSP有潛力發展成為一種新型的食品交聯劑。然而,在此之前,仍需澄清一系列科學問題:1)美拉德反應誘導的交聯被認為是HDSP抗劣化作用的主要機制,但缺乏關鍵證據。2)HDSP中的主要功能性成分是二磷酸化寡糖(DPOS)和單磷酸化寡糖(MPOS)。DPOS是一種磷酸交聯的糊精結構(dextrin-O-(PO2)-O-dextrin),由于其含有兩個還原末端,因此被認為是主要的交聯成分;而MPOS含有暴露的磷酸基團[dextrin-O(PO3),被認為具有保水功能。制備條件如何改變DPOS/MPOS的比例,從而影響穩定效果?3)先前的研究假設交聯需要美拉德反應的中后期階段。這是否確實如此?這直接影響產品的顏色和加工溫度/時間。4)HDSP是否也能穩定豬肉在熱處理過程中的劣化?
        在這項研究中,首先研究了不同制備條件對HDSP中DPOS比例的影響。然后分析了DPOS比例對豬肉的質地、保水能力和熱穩定性的影響。為了進一步研究機制,設計了一個使用豬肉MP的模型水凝膠。研究了HDSP對蛋白質組成、二級結構和化學鍵的影響。結果表明,DPOS是穩定效果的關鍵功能性成分,這與預期一致,并且交聯不需要美拉德反應的后期階段。這項研究為理解HDSP穩定豬肉MP的機制提供了進一步的證據,并擴展了磷酸二淀粉在食品蛋白質修飾中的應用潛力。

        材料與試劑

        豬肉從中國青島的當地家家悅超市購買,并儲存在實驗室的-20°C冷凍柜中。直鏈淀粉和支鏈淀粉購自上海源業生物技術有限公司(上海,中國)。α-淀粉酶(20,000 U/mL)購自上海源業生物技術有限公司(上海,中國)。葡糖淀粉酶(100 IU/mg,來源于黑曲霉)購自J&K Scientific有限公司(北京,中國)。氧化鎂、氯化鈉和硼酸

        制備不同DPOS比例的HDSP

        在先前的研究中,二磷酸化寡糖(DPOS)被認為是酶法水解磷酸二淀粉(HDSP)穩定效果的主要分子成分。然而,這一假設主要基于理論推測(Yu等人,2024年)。為了進一步驗證這一假設,首先制備了不同DPOS比例的HDSP(圖1)。圖2A顯示了HDSP的31P光譜,其中二磷酸基團和單磷酸基團的信號

        結論

        在這項研究中,我們總結了不同制備條件對HDSP中DPOS比例的影響,然后確認DPOS比例與HDSP處理后豬肉的熱穩定性、質地強度和保水能力呈正相關。進一步通過使用MP作為模型證明了HDSP可以提高豬肉中MP凝膠的保水能力、機械強度和微觀結構的緊密度。HDSP處理的肌原纖維

        作者貢獻聲明

        肖瑤:軟件開發、數據分析。楊尚菊:實驗研究、數據管理。郝文輝:初稿撰寫、監督、方法學設計、數據管理。孫迅:審稿與編輯、項目管理、數據分析、概念構思。袁奕軒:數據管理。王曉靜:數據分析

        未引用的參考文獻

        Cao等人,2023年;Chai等人,2025年;Du等人,2025年;Li等人,2025年;O'Sullivan等人,2003年;Soni等人,2021年。

        利益沖突聲明

        作者聲明他們沒有已知的利益沖突或個人關系可能影響本文的研究工作。

        致謝

        本工作得到了國家重點研發計劃(編號:2024YFD2401603)的支持。
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