為評估黃連素對多囊卵巢綜合征的治療潛力，研究首先在DHEA（脫氫表雄酮）聯合高脂飲食誘導的PCOS小鼠模型中探索了其最佳劑量。結果顯示，每日灌胃150 mg/kg黃連素表現出最顯著的治療效果。與未治療的PCOS小鼠相比，該劑量能顯著降低血清睪酮和促黃體生成素水平，提升促卵泡激素和雌二醇水平，使LH/FSH比值趨于正常。卵巢組織學檢查也證實，150 mg/kg/天的黃連素治療可大幅減少PCOS特征性的囊狀卵泡數量，表明黃連素能以劑量依賴的方式改善PCOS的內分泌異常和卵巢囊性形態。

研究者進一步比較了N-乙酰半胱氨酸、肌醇、黃連素及其聯合制劑對PCOS的治療效果。結果顯示，肌醇/黃連素聯合治療在糾正激素失衡方面展現出超越單一療法的優越性。它能更有效地降低LH/FSH比值，并促使睪酮和雌二醇水平趨于正常。連續十天的動情周期監測顯示，PCOS小鼠周期停滯在長期發情期，而肌醇/黃連素組合治療能最顯著地恢復包含發情前期、發情期、發情后期和發情間期的規律動情周期，表明其在改善生殖功能方面的協同增效作用。

胰島素抵抗和肥胖是PCOS的核心代謝特征。研究發現，所有干預措施（包括N-乙酰半胱氨酸、肌醇、黃連素及其組合）均能降低PCOS小鼠的體重和脂肪質量百分比，其中肌醇/黃連素組合的效果最為顯著。葡萄糖耐量測試和胰島素耐量測試表明，未治療的PCOS小鼠存在嚴重的糖耐量受損和胰島素抵抗，而各治療組均能改善這些指標，肌醇/黃連素組合在提升葡萄糖耐量和胰島素敏感性方面同樣表現最佳。這些結果表明，肌醇/黃連素組合能有效緩解PCOS小鼠的肥胖、糖耐量受損和胰島素抵抗，在全身代謝調節方面具有協同益處。

排卵功能障礙是PCOS無排卵性不孕的主要原因，與卵泡發育異常有關。組織學染色顯示，肌醇/黃連素治療能顯著減少PCOS卵巢的囊狀卵泡形成，并保護正常的卵泡結構。在PCOS卵巢中，卵泡膜細胞層增厚而顆粒細胞層變薄，破壞了正常的卵泡膜細胞/顆粒細胞厚度比。所有藥物干預都部分地糾正了這一組織學異常。定量分析表明，肌醇/黃連素治療有效阻止了PCOS小鼠次級卵泡和竇卵泡數量的下降。連續的繁殖實驗進一步證實，PCOS小鼠的累計產仔數在20周內減少，而給予肌醇/黃連素可顯著增強其生殖能力。

顆粒細胞對卵母細胞成熟至關重要。透射電鏡觀察發現，PCOS小鼠的顆粒細胞線粒體存在嚴重異常，表現為嵴結構破壞或缺失，而肌醇/黃連素治療顯著降低了異常線粒體的比例。線粒體DNA拷貝數和細胞內ATP水平在PCOS顆粒細胞中顯著降低，經藥物治療后得到恢復，其中肌醇/黃連素組合的提升作用最大。類固醇生成基因分析顯示，PCOS顆粒細胞中StAR和3βHSD的表達上調，而Cyp19a1（芳香化酶）表達減少。藥物治療普遍使StAR和3βHSD表達正常化，其中肌醇/黃連素作用最強，但Cyp19a1的表達在單獨使用N-乙酰半胱氨酸、肌醇或黃連素時未觀察到顯著恢復。

通過非靶向代謝組學分析發現，PCOS顆粒細胞存在廣泛的代謝失調。在核苷酸代謝方面，PCOS顆粒細胞中參與嘌呤和嘧啶代謝的代謝物（如腺苷、尿苷-5‘-單磷酸、腺苷一磷酸和腺嘌呤）顯著減少，表明核苷酸周轉和能量可用性受損。而補充肌醇/黃連素能將這些代謝物水平恢復至接近對照組水平。在脂肪酸代謝方面，PCOS顆粒細胞表現出長鏈脂肪酸（如十一烷二酸、十五烷酸、十四烷二酸）的顯著積聚，同時介導脂肪酸β-氧化的肉堿和乙酰肉堿水平也顯著升高，表明脂肪酸利用障礙。肌醇/BBR補充劑顯著降低了這些升高的代謝物。此外，肌醇/黃連素組合還能恢復PCOS顆粒細胞中氨基酸（如精氨酸/脯氨酸代謝和尿素循環中的精氨琥珀酸）的代謝模式。

肌醇和D-手性肌醇通過不同的生物學機制發揮作用，而以生理比例補充這兩種異構體已在PCOS管理中顯示出臨床益處。黃連素作為一種天然異喹啉生物堿，可增強胰島素敏感性并降低高雄激素血癥。本研究表明，肌醇/黃連素組合能更有效地糾正PCOS小鼠的內分泌紊亂，改善卵巢形態（減少囊狀卵泡、使顆粒細胞/卵泡膜細胞結構正常化），并部分恢復類固醇生成酶的表達。代謝組學數據揭示了PCOS顆粒細胞廣泛的代謝失調，包括核苷酸庫耗竭、長鏈脂肪酸積累和精氨酸/脯氨酸代謝減少，而肌醇/黃連素補充劑在很大程度上逆轉了這些異常。線粒體功能障礙是PCOS的另一標志，本研究中PCOS小鼠顆粒細胞表現出明顯的線粒體異常，而肌醇/黃連素治療通過恢復線粒體形態、增加mtDNA拷貝數和提高ATP水平減輕了這些缺陷。總之，肌醇/黃連素療法通過協同調節類固醇生成、線粒體功能和顆粒細胞代謝，改善了PCOS小鼠的內分泌、代謝和生殖表型。這些發現為肌醇/黃連素作為PCOS聯合干預措施的潛力提供了臨床前證據。