同種異體造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）是治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤的一種潛在治愈性手段。隨著移植后環(huán)磷酰胺（PTCy）和抗胸腺細(xì)胞球蛋白（ATG）被用于移植物抗宿主病（GvHD）的預(yù)防，單倍體相合（HID）造血干細(xì)胞移植的療效已可與全相合供者移植相媲美。在移植后最初5天內(nèi)發(fā)生的非感染性發(fā)熱，被稱(chēng)為“單倍體熱”（HF），已成為HID HSCT中一個(gè)重要的臨床問(wèn)題。值得注意的是，在接受PTCy預(yù)防的患者中HF發(fā)生率（約90%）顯著高于接受ATG預(yù)防的患者（約38%）。隨著HID HSCT的廣泛應(yīng)用，了解HF的發(fā)生率、風(fēng)險(xiǎn)因素和臨床意義變得日益重要。然而，在ATG預(yù)防的背景下，HF的病理生理、風(fēng)險(xiǎn)因素及其對(duì)移植結(jié)局的影響在很大程度上仍是未知的。

本研究是一項(xiàng)單中心回顧性研究，基于上海瑞金醫(yī)院的移植數(shù)據(jù)庫(kù)。篩選了2021年4月至2023年4月期間連續(xù)接受allo-HSCT的患者。最終納入了143例接受HID HSCT的連續(xù)患者。所有患者均接受了來(lái)自HID供者的粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）動(dòng)員的外周血干細(xì)胞。GvHD預(yù)防方案包括ATG（71例患者）或PTCy（72例患者）。HF被定義為移植后第0天至第+5天期間，在無(wú)明確病原體的情況下體溫≥38°C，且被認(rèn)為與移植物輸注相關(guān)。

在整個(gè)隊(duì)列中，共有62例患者（43.1%）發(fā)生了HF，其中包括41例接受PTCy和21例接受ATG預(yù)防的患者。與未發(fā)生HF（NHF）的患者相比，HF患者回輸?shù)膯魏思?xì)胞（MNCs）和CD34⁺細(xì)胞劑量顯著更高。此外，接受PTCy預(yù)防的患者HF發(fā)生率顯著高于接受ATG預(yù)防的患者（66.1% vs 33.9%）。在ATG隊(duì)列中進(jìn)行的專(zhuān)門(mén)分析進(jìn)一步顯示，HF的發(fā)生與回輸?shù)腃D34⁺細(xì)胞、MNCs、CD3⁺T細(xì)胞、CD8⁺T細(xì)胞，特別是CD4⁺記憶T（TM）細(xì)胞的劑量更高相關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)表明，在ATG預(yù)防的HID HSCT中，HF的風(fēng)險(xiǎn)因素與PTCy背景下報(bào)道的類(lèi)似。

研究發(fā)現(xiàn)，HF患者發(fā)生II-IV級(jí)急性GvHD（aGvHD）的累積發(fā)生率顯著高于NHF患者。盡管III-IV級(jí)aGvHD的發(fā)生率在兩組間無(wú)顯著差異，但HF患者發(fā)生慢性GvHD（cGvHD）的3年累積發(fā)生率顯著更高。多變量分析證實(shí)，HF是II-IV級(jí)aGvHD和cGvHD的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。這些結(jié)果表明，HF的出現(xiàn)與后續(xù)發(fā)生GvHD，特別是cGvHD的風(fēng)險(xiǎn)增加密切相關(guān)。

在生存結(jié)局方面，HF患者表現(xiàn)出更低的3年微小殘留病（MRD）累積復(fù)發(fā)率，以及顯著更優(yōu)的3年無(wú)事件生存期（EFS）。然而，兩組間的3年總體生存期（OS）、白血病無(wú)病生存期（LFS）和移植物抗宿主病-無(wú)復(fù)發(fā)生存期（GRFS）未見(jiàn)顯著差異。進(jìn)一步的中介分析揭示，HF對(duì)MRD復(fù)發(fā)和EFS的影響，大約有45%-46%是通過(guò)cGvHD介導(dǎo)的。這表明HF可能通過(guò)誘發(fā)cGvHD，間接帶來(lái)了移植物抗白血病（GvL）效應(yīng)，從而降低了復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)并改善了部分生存指標(biāo)。

當(dāng)按GvHD預(yù)防方案分層分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)在ATG預(yù)防組中，HF患者相比NHF患者有顯著更高的cGvHD發(fā)生率、更低的MRD復(fù)發(fā)率以及更優(yōu)的EFS。而在PTCy預(yù)防組中，HF患者則表現(xiàn)出更高的II-IV級(jí)aGvHD和cGvHD發(fā)生率，但對(duì)MRD復(fù)發(fā)和EFS的影響未見(jiàn)同樣顯著的益處。這提示HF的臨床意義和潛在機(jī)制可能因使用的GvHD預(yù)防藥物（ATG vs PTCy）不同而存在差異。

為了探究HF影響cGvHD和MRD復(fù)發(fā)的潛在免疫學(xué)機(jī)制，研究團(tuán)隊(duì)分析了ATG預(yù)防患者的免疫重建模式。研究發(fā)現(xiàn)，HF組患者的CD3⁺T細(xì)胞和CD4⁺T細(xì)胞數(shù)量快速重建，并以CD4⁺記憶T細(xì)胞為主，而B(niǎo)細(xì)胞重建則較NHF組緩慢。在移植后第90天，HF患者的CD3⁺T細(xì)胞、CD8⁺T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)，特別是CD4⁺記憶T細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)顯著更高。此外，HF患者的T細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的活化狀態(tài)，表現(xiàn)為CD4⁺CD28⁺和CD8⁺CD28⁺T細(xì)胞數(shù)量增加。這些結(jié)果表明，HF與早期快速、以活化記憶T細(xì)胞為主導(dǎo)的免疫重建模式相關(guān)。

為了在分子層面理解HF的發(fā)生機(jī)制，研究對(duì)移植后第2天采集的外周血CD3⁺T細(xì)胞進(jìn)行了RNA測(cè)序分析。與NHF組相比，HF組有202個(gè)基因上調(diào)和219個(gè)基因下調(diào)。上調(diào)的基因富集于細(xì)胞周期、淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫、T細(xì)胞活化及GvHD等相關(guān)通路。其中，與淋巴細(xì)胞活化、分化、細(xì)胞毒活性和細(xì)胞周期進(jìn)展相關(guān)的基因（如IL2RB, CD8B, GZMM, MKI67等）表達(dá)顯著升高。利用CIBERSORTx對(duì)免疫細(xì)胞組成的估算顯示，HF組中活化的CD4⁺記憶T細(xì)胞比例更高。進(jìn)一步分析表明，免疫激活和細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)基因主要在CD4⁺T細(xì)胞中高表達(dá)。這提示，在ATG預(yù)防背景下，移植后早期即存在的、高度活化并處于增殖狀態(tài)的CD4⁺記憶T細(xì)胞，可能在HF的發(fā)生發(fā)展中扮演了關(guān)鍵角色。這部分細(xì)胞可能對(duì)ATG的清除作用具有一定的抵抗力。

本研究系統(tǒng)闡述了在ATG預(yù)防的成人HID HSCT中，HF的發(fā)病率、臨床意義、風(fēng)險(xiǎn)因素及潛在機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，HF的發(fā)生與回輸更高劑量的CD4⁺記憶T細(xì)胞有關(guān)。盡管HF患者面臨更高的GvHD風(fēng)險(xiǎn)，但他們也表現(xiàn)出更低的MRD復(fù)發(fā)率和更好的EFS，這提示HF可能與增強(qiáng)的GvL效應(yīng)存在關(guān)聯(lián)。從機(jī)制上看，HF的特征是移植后早期CD4⁺記憶T細(xì)胞的快速重建和持續(xù)活化，這部分細(xì)胞可能對(duì)ATG介導(dǎo)的清除具有抵抗力，并驅(qū)動(dòng)了細(xì)胞因子釋放和發(fā)熱反應(yīng)。

研究的發(fā)現(xiàn)具有重要的臨床啟示。HF或許可以作為一個(gè)預(yù)測(cè)cGvHD和潛在GvL效應(yīng)的早期臨床標(biāo)志。對(duì)介導(dǎo)HF的關(guān)鍵細(xì)胞亞群——CD4⁺記憶T細(xì)胞的深入研究，可能有助于優(yōu)化移植策略，例如調(diào)整回輸細(xì)胞的組成或聯(lián)合用藥方案，旨在平衡GvHD和GvL效應(yīng)，最終改善患者的長(zhǎng)期預(yù)后。當(dāng)然，本研究作為回顧性單中心研究，樣本量相對(duì)有限，未來(lái)需要更大規(guī)模的前瞻性研究來(lái)驗(yàn)證這些發(fā)現(xiàn)，并更精細(xì)地闡明參與HF的具體免疫細(xì)胞亞群及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。