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        由SynMicrobe驅動的木質纖維素腐殖化過程:通過宏蛋白質組學揭示的關鍵酶、代謝途徑以及兩階段降解-重建機制

        《Journal of Biotechnology》:SynMicrobe-driven lignocellulose humification: Key enzymes, metabolic pathways, and two-stage degradation-reconstruction mechanisms revealed via metaproteomics

        【字體: 時間:2026年03月02日 來源:Journal of Biotechnology 3.9

        編輯推薦:

          本研究利用蛋白組學和生物信息學解析微生物接種劑驅動木質纖維素降解及腐殖化機制,鑒定12091個差異蛋白,顯著上調糖苷水解酶(GH)、多酚氧化酶(POD)等關鍵酶,揭示苯丙烷降解和甘氨酸循環為核心代謝通路,構建微生物協同調控的腐殖化兩階段模型,為優化有機質腐殖化提供新理論。

          
        秦曉雅|鮑瑞新|黃文宇|李群良
        廣西大學化學與化學工程學院,中國南寧530004

        摘要

        盡管許多研究探討了微生物接種劑在有機物分解中的作用,但木質纖維素轉化為腐殖質的詳細蛋白質組機制和代謝調控網絡仍不甚明了。基于此,本研究利用宏蛋白質組學和生物信息學技術闡明了微生物接種劑驅動木質纖維素降解和腐殖質形成的蛋白質組機制和代謝網絡。主要發現包括鑒定出12091個差異表達的蛋白質,其中糖苷水解酶(GHs)、多銅氧化酶和過氧化物酶(PODs)的表達顯著上調(p<0.05)。代謝分析表明,苯丙烷降解途徑(ko00362)和乙二酸循環(ko00630)對腐殖質合成至關重要。共表達網絡顯示,多功能氧化還原酶(K00430)和ABC轉運蛋白(K02000)模塊與腐殖質化效率高度相關(R2=0.80)。本研究首次在蛋白質組水平上闡明了兩階段模型,為優化有機物腐殖質化提供了新的見解。

        引言

        木質纖維素作為植物生物量的主要成分,是地球上最豐富的可再生有機資源(Abdel-Hamid, Solbiati, & Cann, 2013; Betts, Dart, Ball, & Pedlar, 1991)。其高效轉化和利用對于實現碳中和和可持續資源開發具有重要意義。在自然生態系統中,由微生物驅動的木質纖維素腐殖質化過程是碳循環的核心環節(Ding et al., 2025)。它不僅影響土壤有機質的形成和穩定性,還與環境污染物降解和生態恢復相關。然而,關于這一過程的分子機制仍存在重大知識空白,特別是微生物群落通過共代謝網絡實現木質纖維素降解-重構為腐殖質的動態規律。傳統研究大多關注單一菌株或簡單菌群的降解功能(Cheng et al., 2022, Hsin et al., 2025; K. Wang et al., 2022)。對多酶協同作用、代謝途徑交叉以及復雜細菌調控下腐殖質化關鍵節點的系統性理解不足,限制了人工調控技術的發展和應用。
        宏基因組技術通常關注宏基因組的定量功能組成及其相關翻譯表達的功能蛋白(Riffle et al., 2017, Smirnova, 2011)。目前,一些研究利用宏基因組方法探索了降解纖維素的微生物群落的結構和酶系統。Liu等人(D. M. Liu et al., 2015)通過宏基因組方法分析了堆肥微生物群落,揭示了堆肥過程中的主要微生物組成,并檢測到三種關鍵的纖維素降解酶(蘋果酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、蘋果酸合成酶),發現真菌在堆肥反應早期是纖維素酶的主要產生者。Hori等人(Chiaki Hori, 2018)通過宏基因組學分析了腐爛松木的微生物群落,發現其中含有11種碳水化合物酯酶和23種糖苷水解酶,分別作用于纖維素和半纖維素。
        芽孢桿菌屬細菌是革蘭氏陽性、能形成孢子的細菌,以其耐受高溫和不同pH值等極端條件的能力而聞名(Otiniano, Farfán-Córdova, Cabeza, & Cabanillas-Chirinos, 2024)。它們還具有很強的脂質和蛋白質降解酶活性。另一方面,子囊菌門下的曲霉菌屬在分解纖維素和木質素方面效率很高(Andlar et al., 2018, López-González et al., 2015)。研究表明,某些菌株(如地衣芽孢桿菌和煙曲霉)能產生增強生物降解的碳水化合物活性酶(CAZymes)(Forsberg et al., 2014; Frandsen, Poulsen, Tovborg, Johansen, & Lo Leggio, 2017; Nekiunaite, Arntzen, Svensson, Vaaje-Kolstad, & Abou Hachem, 2016)。
        近期研究越來越多地將這兩種菌株作為接種劑應用于堆肥過程。地衣芽孢桿菌能產生耐熱的α-淀粉酶和纖維素酶,有助于嗜熱階段的有機質快速降解(Declerck et al., 2003; Naoko Fujimoto, 2011)。在低溫堆肥中,地衣芽孢桿菌的接種使有機質降解提高了31.2%,生物熱產生增加了16.5%,主要通過改善碳水化合物代謝和微生物網絡合作實現(Su et al., 2024)。類似地,煙曲霉擁有豐富的木質纖維素分解酶,包括263種糖苷水解酶,其分泌組能動態適應不同的植物基底物(Sharma Ghimire et al., 2016)。將煙曲霉與多種芽孢桿菌共同接種可顯著提高秸稈堆肥中的木質纖維素降解和腐殖質形成,木質素降解率可達58.27%(Qu et al., 2025)。此外,CRISPR/Cas9介導的基因工程成功增強了煙曲霉的內葡聚糖酶活性,提高了其在生物質處理中的生物技術潛力(Benites-Pariente, Samolski, Lude?a, & Villena, 2024)。這些發現突顯了地衣芽孢桿菌和煙曲霉在加速堆肥過程和改善堆肥質量方面的互補作用。
        總之,本研究的目標是:(1)鑒定參與木質纖維素降解和腐殖質化的關鍵酶和代謝途徑;(2)闡明兩階段降解-重構機制,提出一個微生物驅動的模型。

        實驗設計與蛋白質組鑒定概述

        表1總結了研究中鑒定出的蛋白質及其變異體的定量分析結果。共鑒定出34,892種蛋白質,占數據集的100%。其中,26,060種蛋白質(74.69%)表現出顯著變化,p值閾值低于0.05。進一步分類顯示,有11,497種蛋白質上調(占總數的32.95%),10,950種蛋白質下調(占總數的31.38%)。這些結果表明有大量蛋白質發生了改變。

        結論

        本研究通過深入的宏基因組分析,系統揭示了微生物驅動木質纖維素降解和腐殖質化的分子機制,鑒定出以糖苷水解酶和過氧化物酶為中心的關鍵功能蛋白群,并分析了苯丙烷降解和乙二酸循環在腐殖質合成中的核心作用。研究還發現了多功能氧化還原酶和ABC轉運蛋白的共表達網絡。

        未引用的參考文獻

        (Betts et al., 1991, Hori et al., 2018, Fujimoto et al., 2011, Salmon et al., 2013, Salmon et al., 2013, van Erven et al., 2017, Wang et al., 2021, Wang et al., 2021, Zhang Gen et al., 2023)

        CRediT作者貢獻聲明

        黃文宇:正式分析、數據管理。鮑瑞新:正式分析、數據管理。李群良:撰寫——審稿與編輯、項目管理、概念構思。秦曉雅:撰寫——初稿、方法學研究、資金獲取、正式分析。

        利益沖突聲明

        作者聲明沒有已知的財務利益沖突或個人關系可能影響本文的研究結果。

        致謝

        本研究得到了國家自然科學基金(項目編號22468012)的支持。
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