《Microchemical Journal》：Development and validation of a green spectrofluorometric method for ganciclovir determination using bio-synthesized silver nanoprobes
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本研究采用芝麻種子提取物綠色合成高熒光銀納米顆粒（Ag-NPs），作為熒光探針用于滴眼液ganciclovir檢測。優化條件（0.5?mM AgNO?，70?°C，90?min）獲得25?±?5?nm的球形分散Ag-NPs，在280?nm激發下產生370?nm強藍熒光。方法線性范圍2–10?μg/mL（r2=0.998），驗證顯示高精度（RSD?
Sherin F. Hammad | Mary A. Michael | Aya Gamal | Fotouh R. Mansour
藥學分析化學系，坦塔大學藥學院，坦塔 31111，埃及
摘要
通過綠色合成策略開發可持續熒光探針已成為現代分析化學的關鍵方向。這一方向旨在在保持高靈敏度和分析性能的同時，將環境影響降至最低。本研究的目的是開發一種用于眼藥水的更環保的甘昔洛韋檢測方法。本研究介紹了一種利用芝麻籽提取物作為還原劑和穩定劑的新型綠色合成方法，通過簡單的加熱板技術制備出高熒光性的銀納米粒子（Ag-NPs）。優化的合成條件（0.5 mM AgNO?，70 °C，反應時間90分鐘）產生了球形、分散良好的Ag-NPs，在280 nm激發下在370 nm處表現出強烈的藍色熒光。通過紫外-可見光譜（UV–Vis）、透射電子顯微鏡（TEM）、傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）、能量色散X射線光譜（EDX）和X射線衍射（XRD）的全面表征，證實了穩定Ag-NPs的成功制備，其平均粒徑為25 ± 5 nm。所合成的Ag-NPs作為高效的熒光納米探針，能夠靈敏地檢測甘昔洛韋，在2–10 μg/mL范圍內表現出線性響應，相關系數（r2 = 0.998）。根據ICH指南進行的驗證顯示該方法具有高精度（RSD < 2%）和準確度（回收率98–102%）。該方法成功應用于Ganvir?眼藥水制劑中，與參考HPLC方法的結果高度一致。使用多種綠色評估指標（包括Analytical GREEnness (AGREE)、改良的綠色分析程序指數（MoGAPI）、綠色分析星級區（AGSA）和碳足跡減少指數（CaFRI）進行的環境評估表明該方法具有出色的環保性；而實際應用性評估（藍色適用性等級指數BAGI: 65和點擊分析化學指數CACI: 75）則證實了其在常規分析中的良好適用性。這項工作代表了首次將芝麻衍生的Ag-NPs用于甘昔洛韋的檢測，為藥品質量控制實驗室提供了一種可持續、靈敏且實用的新方法。
引言
納米粒子（NPs）是尺寸在1至100 nm之間的小顆粒[1]。NPs的物理化學特性，如獨特的電導率和熱導率、光吸收、熔點、潤濕性、量子限制和催化活性，使其在技術進步和性能提升方面優于其塊狀對應物[2]、[3]。金屬納米粒子（MNPs）因其小尺寸、高單分散性和物理化學特性而受到廣泛關注[4]、[5]。在這類MNPs中，銀納米粒子（Ag-NPs）因其獨特的物理化學性質和相對較高的安全性而脫穎而出。
近年來，由于Ag-NPs的毒性較低，因此被廣泛使用[6]。Ag-NPs在納米尺度上展現出獨特的物理化學性質，包括增強的表面反應性和尺寸依賴的光學行為[7]�；谶@些性質，Ag-NPs被廣泛應用于抗癌劑[8]、[9]、[10]、[11]、[12]、[13]、抗菌劑[14]、生物醫學設備[15]、催化[16]、環境修復[17]、[18]、復合纖維、生物傳感器材料[19]、廢水處理[20]、污染治理[21]、食品包裝材料[22]、食品儲存容器[23]、化妝品[24]和水凈化器[25]、[26]等領域。由于Ag-NPs在納米技術、生物學和環境領域的廣泛應用，迫切需要開發經濟高效的合成技術[7]。目前有多種方法（包括物理、化學和生物方法）可用于Ag-NPs的合成[27]。
傳統的物理和化學方法合成Ag-NPs通常存在一些缺點，如能耗高、使用有害化學物質、環境風險以及生物相容性有限，這些都與綠色化學的原則相悖[28]。此外，傳統方法往往需要昂貴且復雜的設備，從而降低了其可持續性和可獲取性，相比之下，最近使用的綠色合成方法更為簡單和經濟[29]。因此，綠色合成技術被用來克服這些挑戰[30]。
基于植物的Ag-NPs合成方法已成為傳統化學和物理過程的環保替代方案，因為它具有低毒性、經濟性和可持續性[31]。芝麻（
Sesamum indicum）屬于芝麻屬植物[32]。在非洲，野生種類的數量比在印度更多。芝麻因其可食用的種子而被種植，這些種子生長在莢果中，并在全球熱帶地區廣泛自然化。芝麻籽是最早被認識的油料作物之一。芝麻籽富含膳食纖維、脂肪、蛋白質、礦物質和維生素[33]。其中含有許多活性成分，如芝麻酚、芝麻素、芝麻林、生育酚（維生素E）和其他酚類化合物、黃酮類物質以及植物甾醇，這些成分參與了銀的還原和Ag-NPs的生成[34]。
甘昔洛韋是一種合成的無環核苷類似物，屬于2%-脫氧鳥苷，也稱為9-(1,3-二羥基-2-丙氧基甲基)鳥嘌呤或DHPG[35]。甘昔洛韋可用于體外和體內抑制皰疹病毒的復制；其敏感的病毒包括乙型肝炎病毒、Epstein-Barr病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、人類皰疹病毒6型（HHV-6）、巨細胞病毒（CMV）以及單純皰疹病毒1型和2型（HSV-1和HSV-2）。該藥物可通過靜脈注射、口服或眼內給藥來治療免疫抑制患者的CMV感染[36]。因此，已有許多分析技術被用于甘昔洛韋的檢測，包括紫外分光光度法[37]、[38]、[39]、熒光分光法[40]、色譜法[41]、[42]以及電化學方法[44]、[45]、[46]。
本研究旨在提供一種簡單的綠色熒光分光法來檢測甘昔洛韋。該方法依賴于使用芝麻籽提取物輕松合成Ag-NPs。芝麻籽提取物同時起到了還原劑和封端劑的作用。制備的Ag-NPs通過多種分析技術（UV–Vis、FTIR、TEM、EDX和XRD）進行了表征。所合成的Ag-NPs首次被有效用作熒光納米探針，通過增強其自身的熒光特性來檢測劑型中的甘昔洛韋含量。
材料
甘昔洛韋（99.9%）由Sigma Pharmaceutical Industries（埃及Quesna）提供。硝酸銀（98.9%）購自Fischer Scientific（英國Loughborough）。分析級冰醋酸（99%）購自印度Mumbai的Advent Chembio。實驗室級氫氧化鈉（99%）購自法國Pithiviers的ISO-Chem。磷酸（85%）、硝酸（99%）和硼酸（99%）購自印度Mumbai的Srl Chemicals。芝麻（Sesamum indicum）
Ag-NPs的合成與表征
本研究首次采用綠色方法，利用芝麻（Sesamum indicum）籽提取物成功合成了高熒光性的Ag-NPs。該方法中，提取物同時充當了還原劑和穩定劑。銀離子（Ag?）還原為金屬銀（Ag?）的過程通過反應混合物中出現的紅黃色得以視覺確認。此外，制備的Ag-NPs在紫外燈照射下表現出強烈的藍色熒光。
結論
本研究成功建立了一種新型的環保熒光分光法，用于檢測抗病毒藥物甘昔洛韋。關鍵創新在于首次利用芝麻籽提取物制備出高熒光性的Ag-NPs，該提取物在綠色合成過程中同時起到了還原劑和穩定劑的作用。合成的Ag-NPs表現出強烈的內在熒光，在與甘昔洛韋相互作用時熒光強度顯著增強，為高靈敏度的檢測奠定了基礎。
CRediT作者貢獻聲明
Sherin F. Hammad：撰寫 – 審稿與編輯、初稿撰寫、監督、資源管理、項目規劃、方法學設計、實驗設計、概念構思。
Mary A. Michael：撰寫 – 審稿與編輯、初稿撰寫、驗證、監督、方法學設計、數據分析、形式分析。
Aya Gamal：撰寫 – 審稿與編輯、初稿撰寫、驗證、實驗設計、數據管理、概念構思。
Fotouh R. Mansour：撰寫 – 審稿與編輯、撰寫 –
利益沖突聲明
作者聲明他們沒有已知的可能會影響本文研究結果的財務利益或個人關系。
