隨著時間流逝和環(huán)境壓力的累積，我們的皮膚不可避免地會出現(xiàn)老化跡象，如皺紋、松弛、干燥和色素沉著。在這個過程中，陽光中的紫外線，特別是中波紫外線(UVB)，扮演了重要的“催老”角色。它不僅直接損傷皮膚細(xì)胞的DNA，更會在細(xì)胞內(nèi)部引發(fā)一種名為“細(xì)胞衰老”的狀態(tài)。衰老的細(xì)胞雖然停止了分裂，但它們并非安靜“退休”，反而變得活躍，持續(xù)分泌大量促炎因子和信號分子，這種現(xiàn)象被稱為衰老相關(guān)分泌表型(SASP)。SASP就像一個不和諧的廣播塔，會“污染”周圍的健康細(xì)胞，誘使它們也進(jìn)入衰老狀態(tài)，從而放大皮膚的損傷和炎癥，導(dǎo)致皮膚功能障礙，加速老化進(jìn)程。

近年來，一種名為“senotherapeutics”的抗衰老療法策略應(yīng)運而生，旨在通過靶向衰老細(xì)胞來對抗衰老。該策略主要分為兩類：一種是“senolytics”（衰老細(xì)胞清除劑），其作用是像精準(zhǔn)清除雜草一樣，誘導(dǎo)衰老細(xì)胞凋亡；另一種是“senomorphics”（衰老表型調(diào)節(jié)劑），其目標(biāo)不是殺死細(xì)胞，而是調(diào)節(jié)或抑制有害的SASP，從而減輕衰老細(xì)胞對周圍環(huán)境的負(fù)面影響，相當(dāng)于給嘈雜的廣播塔“消音”。雖然一些植物來源的類黃酮化合物如槲皮素和非瑟酮已被證明具有senolytic活性，但其潛在的脫靶毒性限制了臨床應(yīng)用的潛力。因此，尋找更安全、具有衰老調(diào)控活性的天然化合物成為一個重要的研究方向。

紅參，作為一種傳統(tǒng)中藥材，富含人參皂苷等多種生物活性成分，已被證實具有抗氧化、抗炎和光保護(hù)作用，可改善皮膚水合作用和彈性，減輕紫外線損傷。此前有研究表明，人參皂苷Rb1和Rc可保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的衰老，紅參提取物可下調(diào)應(yīng)激角質(zhì)形成細(xì)胞中關(guān)鍵衰老標(biāo)志物p16^{INK4A的表達(dá)。然而，多數(shù)先前研究主要關(guān)注皮膚成纖維細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)重塑，或是一般的光保護(hù)效應(yīng)，并未明確區(qū)分紅參成分在原發(fā)性人角質(zhì)形成細(xì)胞中發(fā)揮的是senolytic還是senomorphic作用，其對SASP介導(dǎo)的旁分泌衰老傳播的影響也未被直接研究。為澄清這些問題，韓國延世大學(xué)原州醫(yī)學(xué)院皮膚科的Sung Ha Lim、Hee-Seok Seo、Hyun Kang和Seung-Phil Hong等研究人員在《Journal of Ginseng Research》上發(fā)表論文，深入探討了高麗紅參來源組分(RGCs)在UVB誘導(dǎo)的人角質(zhì)形成細(xì)胞衰老模型中的senotherapeutic（衰老治療）作用，特別是其對SASP旁分泌傳播的影響。}

為開展研究，作者運用了多項關(guān)鍵實驗技術(shù)。研究使用了原發(fā)性正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(HEKs)。通過重復(fù)亞細(xì)胞毒性劑量UVB照射（累計30 mJ/cm²）誘導(dǎo)細(xì)胞衰老模型。利用Transwell?共培養(yǎng)系統(tǒng)評估SASP介導(dǎo)的旁分泌效應(yīng)。實驗使用了三種紅參來源組分：總提取物(TE)、皂苷組分(Sp)和非皂苷組分(Non-Sp)，并以槲皮素和非瑟酮作為senolytic陽性對照。通過細(xì)胞活力、衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色、Caspase-3/7活性檢測評估細(xì)胞存活與凋亡。采用實時定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法分析衰老標(biāo)志物、SASP因子、分化/增殖標(biāo)志物及相關(guān)信號通路蛋白表達(dá)。通過免疫熒光染色觀察角質(zhì)形成細(xì)胞分化與屏障相關(guān)蛋白。

研究人員首先評估了RGCs的senolytic潛力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陽性對照槲皮素能顯著降低UVB誘導(dǎo)的衰老角質(zhì)形成細(xì)胞活力，而三種RGCs（TE, Sp, Non-Sp）均未表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞毒性或促凋亡作用。相反，TE和Non-Sp組分在特定時間點甚至能提高UVB應(yīng)激下細(xì)胞的活力。這表明RGCs未表現(xiàn)出senolytic活性，而是具有細(xì)胞保護(hù)或促增殖作用。

研究人員進(jìn)一步檢測了senomorphic效應(yīng)。UVB照射顯著上調(diào)了衰老標(biāo)志物p21、p16以及SASP相關(guān)細(xì)胞因子IL-6、IL-8的mRNA和蛋白表達(dá)。RGCs處理，特別是Sp和Non-Sp組分，能顯著降低這些因子的表達(dá)水平，并減少DNA損傷標(biāo)記γH2AX的蛋白表達(dá)。同時，RGCs還能上調(diào)長壽相關(guān)基因SIRT1的表達(dá)，該基因已知可拮抗衰老通路。這些結(jié)果表明RGCs通過senomorphic方式抑制衰老和SASP。

UVB照射導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞分化標(biāo)志物KRT5、TGM1、FLG表達(dá)下調(diào)。RGCs處理可部分恢復(fù)KRT5和TGM1的表達(dá)，對FLG的恢復(fù)作用則較溫和，表明其可部分逆轉(zhuǎn)UVB誘導(dǎo)的早期至中期分化受損。更重要的是，RGCs顯著增強(qiáng)了增殖標(biāo)志物Ki67和PCNA的表達(dá)，并增加了屏障脂質(zhì)成分神經(jīng)酰胺的含量，提示其可促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞增殖并可能增強(qiáng)皮膚屏障功能。

為了探究RGCs是否能減輕衰老細(xì)胞對鄰近細(xì)胞的旁分泌影響，研究采用了Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)。將UVB照射過的衰老細(xì)胞與未照射的正常細(xì)胞共培養(yǎng)，模擬SASP的旁分泌作用。研究發(fā)現(xiàn)，處理UVB照射的“上層”細(xì)胞（衰老細(xì)胞）時，RGCs可適度提高“下層”（正常）細(xì)胞的活力，并減少其SA-β-gal陽性染色比例，表明RGCs可減輕SASP介導(dǎo)的旁分泌應(yīng)激，降低鄰近細(xì)胞的二次衰老。

在共培養(yǎng)系統(tǒng)中，RGCs處理降低了“下層”正常角質(zhì)形成細(xì)胞中p21的表達(dá)，并顯著減少了多種炎癥因子（IL-6, IL-1β, TNF-α）的mRNA水平，蛋白質(zhì)印跡結(jié)果也顯示p16、γH2AX和IL-6蛋白表達(dá)降低。這表明RGCs可調(diào)節(jié)UVB衰老細(xì)胞的SASP，并部分抑制其對鄰近細(xì)胞引發(fā)的炎癥反應(yīng)。

RGCs處理顯著上調(diào)了共培養(yǎng)模型中“下層”細(xì)胞（受SASP影響）的多種分化標(biāo)志物（KRT5, KRT14, FLG, IVL）和增殖標(biāo)志物的表達(dá)。值得注意的是，它還恢復(fù)了NHE1（Na⁺/H⁺交換體1）的表達(dá)，該蛋白對維持表皮酸性pH和屏障完整性至關(guān)重要。免疫熒光染色進(jìn)一步證實了NHE1定位的增加。

為探究活性成分，研究人員測試了代表性人參皂苷Rb1、Rg1、Rg3和Rc。與RGCs組分結(jié)果一致，這些皂苷均未顯著降低UVB應(yīng)激下的細(xì)胞活力，反而表現(xiàn)出細(xì)胞保護(hù)作用。Caspase-3/7活性檢測表明，無論是單個皂苷還是RGCs組分，均未誘導(dǎo)凋亡，反而顯著減弱了UVB引發(fā)的caspase激活，進(jìn)一步證實了其senomorphic而非senolytic的作用模式。

機(jī)制研究表明，UVB照射顯著激活了應(yīng)激反應(yīng)性MAPK通路中的JNK和p38的磷酸化。RGCs處理和人參皂苷（Rb1, Rg1, Rg3, Rc）均能部分減弱這種UVB誘導(dǎo)的JNK和p38磷酸化，并對ERK和AKT信號通路起到一定的調(diào)節(jié)作用。這些信號通路的調(diào)節(jié)與衰老標(biāo)志物p16和SASP因子IL-6表達(dá)的降低相一致，提示RGCs的senomorphic效應(yīng)至少部分是通過調(diào)控UVB激活的MAPK（特別是JNK和p38）和AKT信號通路來實現(xiàn)的。

本研究表明，紅參來源組分在UVB誘導(dǎo)的衰老人角質(zhì)形成細(xì)胞中主要發(fā)揮senomorphic（衰老表型調(diào)節(jié)）作用，而非senolytic（衰老細(xì)胞清除）作用。其核心機(jī)制在于：在不誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的前提下，通過調(diào)控應(yīng)激響應(yīng)性MAPK/AKT信號通路（特別是抑制JNK/p38的過度激活），顯著下調(diào)關(guān)鍵衰老標(biāo)志物和SASP相關(guān)炎癥因子（如p16, p21, IL-6, IL-8, IL-1β）的表達(dá)，同時上調(diào)長壽因子SIRT1。此外，RGCs能增強(qiáng)角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖能力，部分恢復(fù)其早期至中期的分化狀態(tài)，并提升與屏障功能相關(guān)的脂質(zhì)和蛋白（如神經(jīng)酰胺、NHE1）水平。

尤其重要的是，通過Transwell共培養(yǎng)模型，本研究首次直接證實了RGCs能夠減輕UVB衰老角質(zhì)形成細(xì)胞通過SASP對鄰近正常細(xì)胞產(chǎn)生的旁分泌衰老和炎癥效應(yīng)，阻斷了衰老信號在表皮細(xì)胞間的“傳染”。代表性人參皂苷（Rb1, Rg1, Rg3, Rc）可再現(xiàn)RGCs的關(guān)鍵senomorphic表型，證實了皂苷類成分是其發(fā)揮作用的活性物質(zhì)基礎(chǔ)。

這項研究的意義在于，它將紅參的抗皮膚光老化作用機(jī)制明確到了“senomorphic”這一新興的抗衰老策略層面。與可能帶來細(xì)胞毒性風(fēng)險的senolytics相比，senomorphic策略通過調(diào)節(jié)衰老細(xì)胞的“有害輸出”而不殺死細(xì)胞，可能為皮膚抗衰老提供一種更安全、更符合組織穩(wěn)態(tài)維持需求的新途徑。該研究不僅為紅參在皮膚科學(xué)和化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用提供了深入的理論依據(jù)，也為開發(fā)靶向細(xì)胞衰老和SASP的天然來源抗衰產(chǎn)品指明了新的方向。未來需要在動物光老化模型和臨床試驗中進(jìn)一步驗證其生理相關(guān)性和應(yīng)用潛力。