《Phytomedicine》：Xiayuxue Decoction alleviates MASH by regulating gut microbiota, bile acid metabolism, and m6A modification
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代謝性肝病患者需通過中藥復方XYXD調控腸道菌群、膽酸代謝、m6A轉錄修飾及AA代謝等多途徑改善炎癥和脂質代謝失衡。摘要分隔符：
施杰文|趙超群|張定奇|張林章|馮秦英|齊勝蘭|何曉麗|劉萍|穆永平|陳高峰|馬文娜|彭丹|李榮申|王永利|程陽|劉偉
上海中醫藥大學附屬曙光醫院中藥制劑三級實驗室藥學系，中國上海張衡路528號，201203
摘要
背景
代謝功能障礙相關性脂肪性肝炎（MASH）已成為一個全球性的健康挑戰，目前可用的治療選擇有限。逍遙散（XYXD）是一種源自張仲景所著《金匱要略》的經典草藥方劑，其主要成分包括桃（Prunus persica (Linn.) Batsch）、大黃（Rheum palmatum L.）和牽牛子（Eupolyphaga sinensis Walker）。盡管逍遙散在臨床中被用于治療包括MASH在內的慢性肝病，但其確切的分子機制尚未明確。
研究目的
本研究旨在闡明逍遙散治療MASH的機制，重點探討其在腸道微生物群重塑、膽汁酸（BA）代謝、N6-甲基腺苷（m6A）轉錄修飾以及花生四烯酸（AA）代謝中的作用。
方法
通過使用蛋氨酸-膽堿缺乏（MCD）飲食誘導MASH模型，并通過分析脂質譜、肝功能指標和組織病理變化來評估逍遙散的治療效果。通過16S rRNA基因測序對腸道微生物群組成進行表征。同時，利用LC–MS/MS技術對肝臟、血清和糞便中的BA代謝物以及肝臟中的AA衍生物進行代謝組學分析。此外，還測定了與BA代謝、脂質穩態、炎癥反應和m6A修飾相關的相關mRNA和蛋白質的表達譜。使用脫氧膽酸（DCA）和含有逍遙散的血清處理RAW264.7巨噬細胞，以進一步驗證它們在體外對炎癥、m6A修飾和AA代謝的調控作用。
結果
逍遙散通過雙重調節炎癥途徑和脂質代謝穩態發揮治療效果。它通過激活法尼索 X 受體（FXR）- 小異源二聚體伴侶（SHP）通路有效逆轉MCD飲食引起的微生物群失衡，并維持BA穩態，尤其在減少擬桿菌（Clostridium）數量和DCA水平方面發揮作用。進一步的研究表明，DCA可上調甲基轉移酶樣13/14 mRNA，從而增強m6A修飾并影響AA代謝。這種對炎癥、代謝和表觀遺傳途徑的綜合性調節凸顯了逍遙散的系統治療潛力。
結論
逍遙散通過以下多方面的調節機制緩解MASH：它調節腸道微生物群動態，激活FXR–SHP軸以維持BA穩態，并最終調節m6A轉錄修飾以影響AA代謝。這種協調的網絡在疾病干預中建立了微生物群與代謝途徑之間的功能交互作用。
引言
全球范圍內，代謝功能障礙相關性脂肪肝病（MAFLD）已成為最常見的慢性肝病，導致肝硬化和肝細胞癌（HCC）的發病率增加，從而帶來沉重的經濟和健康負擔（Gu等人，2025年）。許多研究表明，成人中MAFLD的患病率在17%至33%之間，其中33%至50%可能患有代謝功能障礙相關性脂肪性肝炎（MASH）（Younossi等人，2023年）。然而，大多數MASH患者沒有癥狀（Harrison等人，2024年）。MASH是肝移植手術的第二大原因。鑒于治療藥物的匱乏，特別是針對MASH的有效治療方法的開發，是一個亟待解決的臨床需求（Michalopoulou等人，2025年）。
MASH的發病機制尚未完全闡明。普遍接受的假說是，肥胖、胰島素抵抗、炎癥、纖維化和遺傳易感性等多種相互因果的因素共同促進了MASH的發生和發展（Friedman等人，2018年）。最新證據表明，膽汁酸（BA）代謝和腸道微生物群的改變在MASH的進展中起重要作用（Cheng等人，2024年；Ping等人，2024年）。肝臟與腸道微生物群之間的雙向關聯被稱為腸-肝軸。在MASH中，飲食引起的腸道微生物群失調伴隨著腸道屏障的功能障礙（Galaris等人，2022年）。腸道微生物群及其代謝物通過受損的腸道上皮進入門脈循環，觸發肝臟炎癥反應（Han等人，2023年）。同時，肝臟通過分泌BA和其他生物活性分子調節腸道信號，從而加劇MASH的發病機制（Fuchs & Trauner，2022年）。法尼索 X 受體（FXR）是一種重要的調節因子，可維持BA穩態，它作為核受體被BA激活，在肝臟和腸道中大量表達，通過小異源二聚體伴侶（SHP）和膽固醇7α-羥化酶（CYP7A1）調節與膽固醇和BA穩態、肝臟糖異生、脂肪生成、炎癥和纖維化相關的基因（Han，2018年）。此外，微生物組衍生的代謝物，包括BA，可作為宿主體內關鍵表觀遺傳酶的底物和輔因子，介導N6-甲基腺苷（m6A）表觀遺傳修飾與腸道微生物組之間的關聯（Wu等人，2022年）。
逍遙散源自張仲景的《金匱要略》，主要由桃（Prunus persica (Linn.) Batsch）、大黃（Rheum palmatum L.）和牽牛子（Eupolyphaga sinensis Walker）組成。這一經典方劑具有千年的臨床應用歷史（Xu等人，2024年）。逍遙散通過促進肝星狀細胞的凋亡發揮抗肝纖維化作用（Zhang等人，2020年）。在HCC中，逍遙散通過調節腸道微生物群來抑制疾病進展，從而調節腸道和肝臟的炎癥以及腸道免疫反應。它還促進初級BA的合成并改善腸道菌群，從而增強自然殺傷T細胞介導的抗肝細胞癌免疫（Deng等人，2024年；Zhou等人，2025年）。研究表明，逍遙散在改善肝病方面具有巨大潛力。然而，其通過調節腸-肝軸及相關代謝物來緩解MASH的作用機制尚不明確。
在本研究中，我們探討了逍遙散對MASH的治療效果及其作用機制。在體內實驗中，我們使用蛋氨酸-膽堿缺乏（MCD）飲食誘導的MASH模型來評估逍遙散的治療效果，并研究其潛在機制。通過16sRNA測序分析腸道微生物群組成，并利用LC–MS/MS技術研究BA代謝和花生四烯酸（AA）代謝途徑。在體外實驗中，我們研究了脫氧膽酸（DCA）和含有逍遙散的血清對RAW264.7巨噬細胞中的炎癥、m6A修飾和AA代謝的影響。通過整合體外和體內的研究結果，我們探討了逍遙散通過調節腸-肝軸來改善MASH的機制。
部分摘要
全球范圍內，代謝功能障礙相關性脂肪肝病（MAFLD）已成為最常見的慢性肝病，導致肝硬化和肝細胞癌（HCC）的發病率增加，從而造成沉重的經濟和健康負擔（Gu等人，2025年）。多項研究表明，成人中MAFLD的患病率在17%至33%之間，其中33%至50%可能患有代謝功能障礙相關性脂肪性肝炎（MASH）（Younossi等人，2023年）。大多數MASH患者沒有癥狀（Harrison等人，2024年），而這增加了肝硬化或HCC的風險（Harrison等人，2024年）。MASH是肝移植手術的第二大原因。鑒于治療藥物的匱乏，特別是針對MASH的有效治療方法的開發，是一個關鍵的未滿足的臨床需求（Michalopoulou等人，2025年）。
MASH的發病機制尚未完全闡明。廣泛接受的假說是，肥胖、胰島素抵抗、炎癥、纖維化和遺傳易感性等多種因素共同促進了MASH的發生和發展（Friedman等人，2018年）。最新證據表明，膽汁酸（BA）代謝和腸道微生物群的改變在MASH的進展中起重要作用（Cheng等人，2024年；Ping等人，2024年）。肝臟與腸道微生物群之間的雙向關聯被稱為腸-肝軸。在MASH中，飲食引起的腸道微生物群失調伴隨著腸道屏障的功能障礙（Galaris等人，2022年）。腸道微生物群及其代謝物通過受損的腸道上皮進入門脈循環，引發肝臟炎癥反應（Han等人，2023年）。同時，肝臟通過分泌BA和其他生物活性分子調節腸道信號，從而加劇MASH的發病機制（Fuchs & Trauner，2022年）。法尼索 X 受體（FXR）是一種重要的調節因子，通過激活BA來維持BA穩態。它在肝臟和腸道中大量表達，通過小異源二聚體伴侶（SHP）和膽固醇7α-羥化酶（CYP7A1）調節與膽固醇和BA穩態、肝臟糖異生、脂肪生成、炎癥和纖維化相關的基因（Han，2018年）。此外，微生物組衍生的代謝物，包括BA，可作為宿主體內關鍵表觀遺傳酶的底物和輔因子，介導N6-甲基腺苷（m6A）表觀遺傳修飾與腸道微生物組之間的關聯（Wu等人，2022年）。
逍遙散源自張仲景的《金匱要略》，主要由桃（Prunus persica (Linn.) Batsch）、大黃（Rheum palmatum L.）和牽牛子（Eupolyphaga sinensis Walker）組成。這一經典方劑已有千年的臨床應用歷史（Xu等人，2024年）。逍遙散通過促進肝星狀細胞的凋亡發揮抗肝纖維化作用（Zhang等人，2020年）。在HCC中，逍遙散通過調節腸道微生物群來抑制疾病進展，從而調節腸道和肝臟的炎癥以及腸道免疫反應。它還促進初級BA的合成并改善腸道菌群，從而增強自然殺傷T細胞介導的抗肝細胞癌免疫（Deng等人，2024年；Zhou等人，2025年）。研究表明，逍遙散在改善肝病方面具有巨大潛力。然而，其通過調節腸-肝軸及相關代謝物來緩解MASH的作用機制尚不清楚。
在本研究中，我們探討了逍遙散對MASH的治療效果及其作用機制。在體內實驗中，我們使用蛋氨酸-膽堿缺乏（MCD）飲食誘導的MASH模型來評估逍遙散的治療效果，并研究其潛在機制。通過16sRNA測序分析腸道微生物群組成，并利用LC–MS/MS技術研究BA代謝和花生四烯酸（AA）代謝途徑。在體外實驗中，我們研究了脫氧膽酸（DCA）和含有逍遙散的血清對RAW264.7巨噬細胞中的炎癥、m6A修飾和AA代謝的影響。通過整合體外和體內的研究結果，我們探討了逍遙散通過調節腸-肝軸來改善MASH的機制。
藥物和試劑
蛋氨酸-膽堿充足（MCS，A02082003BR）和蛋氨酸-膽堿缺乏（MCD，A02082002BR）飲食從Research Diets（美國新澤西）獲得。奧貝膽酸（OCA，459789）從Melan Co.（中國大連）購買。血清丙氨酸氨基轉移酶（ALT，C009-2-1）、血清天冬氨酸氨基轉移酶（AST，C010-2-1）、血清總BA（TBA，E003-2-1）、肝臟甘油三酯（TG，A110-1-1）、Oil Red O染色（D027-1-3）和蘇木精-伊紅（H&E）染色（D006-1-4）試劑盒均已購買
使用UHPLC–Q-Exactive Orbitrap HRMS對逍遙散進行化學分析
使用UHPLC–Q-Exactive Orbitrap HRMS獲得了逍遙散總提取物以及沒食子酸、兒茶素、 amygadalin、普魯蘭辛、蘆薈素-8-O-葡萄糖苷、大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷、番瀉苷B、番瀉苷A、蘆薈素-1-O-葡萄糖苷、槲皮素-8-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-1-O-β-D-葡萄糖苷、蘆薈素、大黃素、大黃素、槲皮素和Physcion等參考化合物混合物的典型指紋色譜圖（圖1A）。此外，
討論
MASH是一種多因素代謝綜合征，目前缺乏有效的治療手段。中醫方劑已成為治療MASH的有希望的候選藥物（Shao等人，2024年）。MASH的發病機制涉及腸道微生物群和BA代謝之間的復雜相互作用（Chávez-Talavera等人，2017年；Wu等人，2021年）。先前的研究表明，逍遙散通過調節BA代謝來改善HCC
結論
逍遙散通過重塑腸道菌群平衡來恢復膽汁酸穩態，從而緩解MASH。這種效應的潛在機制可能涉及減少擬桿菌（Clostridium）的數量和降低DCA的生成。這些變化進而影響m6A修飾，調節AA代謝，并改善炎癥和脂質代謝。這種協調的網絡在疾病干預中建立了微生物群與代謝途徑之間的功能交互作用。
資助
本研究得到了國家自然科學基金（項目編號82474045、82205009）、上海市科學技術委員會支持的上海 Rising-Star 計劃（項目編號24QA2709200、24YF2746600）、上海市自然科學基金（項目編號24ZR1467100）、上海市中醫藥傳承創新發展三年行動計劃（ZY (2025-2027)-3-1-1）、河北手性醫藥技術創新中心開放基金（項目編號ZXJJ20240204）等項目的支持
CRediT作者貢獻聲明
施杰文：概念構思、方法設計、實驗實施、數據分析、原始稿撰寫。趙超群：方法設計、實驗實施、數據分析、資金籌集、數據可視化。張定奇：項目管理、實驗實施、數據分析、數據可視化。張林章：項目管理、方法設計、實驗實施。馮秦英：實驗實施、方法設計、數據可視化。齊勝蘭：實驗實施、概念構思；何曉麗：實驗實施、數據分析；劉萍
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施杰文：原始稿撰寫、方法設計、實驗實施、數據分析、概念構思。趙超群：數據可視化、方法設計、實驗實施、資金籌集、數據分析。張定奇：數據可視化、項目管理、實驗實施、數據分析。張林章：項目管理、方法設計、實驗實施。馮秦英：實驗實施、方法設計、概念構思。齊勝蘭：實驗實施、概念構思。何曉麗：實驗實施、數據分析；劉萍利益沖突聲明
作者聲明他們沒有已知的財務利益或個人關系可能影響本文的研究結果。
