《Talanta》:An ultrasensitive microfiber biosensor for fast detection of alpha-fetoprotein in human serum samples
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微纖維生物傳感器結合光纖環激光器系統,實現甲胎蛋白(AFP)30分鐘內快速檢測,檢測限低至0.042 ng/mL,靈敏度與臨床結果一致,適用于肝癌早期篩查。
Jingao Zhang|Zhen Tian|Yicun Yao|Zefeng Li|Houchang Li|Shi Qiu|Lan Rao|Binbin Yan|Kuiru Wang|Xinzhu Sang|Jing Xi|Shengli Pu|Qiang Wu|Jinhui Yuan
信息光子學與光通信國家重點實驗室,北京郵電大學,北京 100876,中國
摘要
快速檢測甲胎蛋白(AFP)作為腫瘤標志物在早期腫瘤篩查和后續治療過程中至關重要。低檢測限(LoD)的生物傳感器對于快速檢測AFP濃度是必不可少的。本文提出了一種與光纖環形激光器(FRL)系統集成的超靈敏微纖維生物傳感器,可在30分鐘內檢測人體血清樣本中的AFP。該微纖維傳感器由一種錐形七芯光纖(TSCF)組成,將其嵌入FRL系統中以提高品質因數,從而增強測量精度。實驗結果表明,所提出的微纖維生物傳感器在PBS緩沖液中0.1至100 ng/mL的AFP濃度范圍內具有優異的特異性和良好的重復性,其LoD低至0.042 ng/mL。此外,該微纖維生物傳感器的檢測性能能夠有效區分血清中AFP的濃度,并且結果與臨床檢測結果高度一致。因此,所提出的微纖維生物傳感器具有在臨床診斷中廣泛應用的潛力。
引言
肝癌是全球主要的健康負擔之一,也是癌癥相關死亡的主要原因[1]。早期檢測和有效監測肝癌對于提高患者生存率和生活質量至關重要[2, 3]。甲胎蛋白(AFP)作為一種關鍵的癌癥生物標志物,已被廣泛用于肝癌的臨床診斷和預后[4]。常用的技術如酶聯免疫吸附測定(ELISA)和化學發光免疫測定(CLIA)在檢測生物液體中的生物標志物方面具有相對較高的靈敏度。然而,這些傳統方法通常具有較高的檢測限(LOD),這限制了它們在早期肝癌中識別低濃度AFP的能力。此外,這些方法通常涉及復雜的程序,依賴于昂貴的儀器,并需要較長的分析時間,這大大限制了它們在資源有限的環境或即時檢測場景中的實用性[5, 6, 7]。
近年來,由于光纖生物傳感器具有高靈敏度、抗電磁干擾、緊湊性和實時監測能力等優越特性,已成為生物醫學檢測中最有前景的替代方案之一[8, 9, 10]。為了進一步提高其對周圍環境的響應性,人們廣泛探索了各種結構改進,如錐形光纖[11]、布拉格光柵[12]和U形光纖[13]。這些設計的幾何結構有效增強了倏逝場與外部介質之間的相互作用,從而提高了傳感器對周圍折射率變化的靈敏度。同時,結合了先進的傳感原理,包括局域表面等離子體共振(LSPR)[14, 15, 16]、在色散轉折點(DTP)處操作[17]以及利用vernier效應[18, 19],實現了顯著的信號放大和噪聲降低。定制的光纖結構與這些創新傳感機制的結合,使得檢測平臺能夠實時監測生物分子相互作用,同時提高了速度和準確性。2019年,Chen等人使用等離子體傾斜光纖光柵傳感器實時監測了微升樣品體積中AdoHcy與蛋白質Set7之間的相互作用[20]。2024年,Zhang等人提出了一種基于DTP的超靈敏錐形光纖生物傳感器用于癌細胞檢測,其中鏈霉親和素和癌細胞的LoD分別為28.73 pM和49 cells/mL[21]。2025年,Huang等人提出了一種基于多模光纖-無芯光纖-多模光纖(MNM)結構的表面等離子體共振(SPR)光纖生物傳感器,可以檢測PlGF,其LoD為1.354 pg/mL[22]。2025年,Noman等人展示了一種僅具有U形芯的POF,涂有GO/PVA,可以檢測血紅蛋白分子,其LoD為0.073 mg/mL,響應時間約為3分鐘[23]。
將光纖生物傳感器與激光系統集成可以產生半高寬(FWHM)窄、消光比(ER)高和品質因數(Q factor)高的檢測信號,使其適用于在復雜生物樣本中高精度檢測低濃度生物標志物[25, 26, 27, 28, 29]。2023年,Chen等人展示了一種與摻鉺光纖激光器集成的光纖生物傳感器,用于快速檢測牛奶和生菜中的單核細胞增生李斯特菌[30]。2024年,Hu等人提出了一種雙波長光纖激光傳感系統,輔以微波光子解調技術,用于特異性檢測血清中的腫瘤標志物癌胚抗原相關細胞粘附分子5,其LoD為0.076 ng/mL[31]。目前,用于AFP檢測的光纖生物傳感器的發展仍然有限,迄今為止只有少數報道[32]。以往傳感器的被動光譜探測機制受到固有寬共振線寬和低品質因數的限制,導致檢測低濃度AFP的分辨率不足。
本文提出了一種新型錐形七芯光纖(TSCF)生物傳感器,與光纖環形激光器(FRL)系統集成,用于快速且超靈敏地檢測人體血清樣本中的AFP。由于將錐形七芯光纖(TSCF)集成到FRL系統中,生物傳感器的光譜響應品質因數顯著提高,這直接關系到測量精度。TSCF的表面經過AFP抗體的功能化處理,能夠選擇性地捕獲目標AFP。所提出的微纖維生物傳感器為開發便攜、成本效益高且高精度的早期肝癌診斷和臨床分析方法提供了巨大潛力。
部分內容摘錄
TSCF生物傳感器的傳感機制
圖1(a)和1(b)展示了所提出的TCF生物傳感器及其表面固定化的AFP的示意圖,AFP抗體將特異性地與目標AFP結合。如圖1(a)所示,當光線從輸入的SMF傳播到TSCF部分時,將激發超模,并在輸出SMF處產生干涉,形成干涉光譜。TSCF的倏逝場將與TSCF生物傳感器表面捕獲的AFP相互作用,從而產生
TSCF生物傳感器的功能化
為了使傳感器能夠特異性地檢測AFP,首先需要在傳感器表面對TSCF進行AFP抗體的功能化處理[33, 34]。圖4(a)展示了功能化過程的示意圖。
- i)
首先,將制備好的TSCF浸入1 mol/L的NaOH溶液(產品代碼:1310-73-2,aladdin)中1小時,以在TSCF表面產生豐富的硅醇基團(Si-OH)。
- ii)
TSCF再浸入5%的硅烷中
結論
總結來說,本文提出并研究了一種與FRL系統集成的新型TSCF生物傳感器用于AFP檢測。通過在TSCF表面功能化AFP抗體并將其集成到FRL系統中,實現了對AFP的高靈敏度和高分辨率檢測。實驗結果顯示,在0.1至100 ng/mL的AFP濃度范圍內,傳感器表現出良好的半對數線性,LoD為0.042 ng/mL。為了驗證其實際應用
CRediT作者貢獻聲明
Jinhui Yuan:撰寫 – 審稿與編輯、監督、軟件、資源獲取。Yicun Yao:資源、項目管理、研究、正式分析。Qiang Wu:撰寫 – 審稿與編輯、驗證、監督、軟件、正式分析。Zhen Tian:方法學、研究。Shi Qiu:項目管理、方法學、研究。Houchang Li:資源、方法學、研究。Binbin Yan:方法學、資金獲取、正式分析。Lan Rao:軟件
利益沖突聲明
?作者聲明以下可能被視為潛在利益沖突的財務利益/個人關系:無
本手稿的提交不存在利益沖突,所有作者均同意發表。我代表我的合作者聲明,所描述的工作是原創研究,尚未在其他地方全部或部分發表。所有作者
致謝
本工作部分得到了國家自然科學基金(編號:62275015)、北京郵電大學的基礎研究基金(編號:2025JCTP06)、BUPT優秀博士生基金(CX20241020)、英國工程與物理科學研究委員會(UKRI1459, EP/Y034538/1和EP/Y036115/1)、歐盟地平線MSCA DN OWIN6G(101119624)以及皇家學會國際交流2022第一輪(IES\R1\221108)的支持。