RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，最佳反應(yīng)溫度在37°C左右。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成，對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中，由兩個(gè)相對的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過程進(jìn)行得非常快，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。

PCR替代技術(shù)，RPA全攻略之疑難解答
了解了RPA技術(shù)的原理和特色，現(xiàn)在你一定對這個(gè)技術(shù)產(chǎn)生了不少疑問。

PCR替代技術(shù)，RPA全攻略之引物設(shè)計(jì)
RPA的擴(kuò)增引物可以說是整個(gè)反應(yīng)的關(guān)鍵所在，那么怎樣才能設(shè)計(jì)好RPA引物呢？

PCR替代技術(shù)，RPA引物與探針的常見問題
在RPA擴(kuò)增的基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針，可以實(shí)現(xiàn)多樣化的RPA應(yīng)用。

RPA在HIV檢測中大顯身手
PCR是嬰兒HIV診斷的金標(biāo)方法，但許多地區(qū)并不具備這樣的條件，而RPA技術(shù)正好可以大展身手。

RPA在癌癥研究中的應(yīng)用
RPA不僅可以實(shí)現(xiàn)癌癥突變的快速檢測，還能用于抗癌藥物的快速篩選。

RPA檢測埃博拉等致命病毒
研究者們在RPA技術(shù)的基礎(chǔ)上，開發(fā)了檢測多種致命病毒的快速方案。

RPA成為致病菌檢測的得力工具
在臨床診斷和食品安全領(lǐng)域，RPA技術(shù)可以對常見致病菌進(jìn)行快速檢測。

農(nóng)科院專家用RPA快速檢測轉(zhuǎn)基因作物
要更好的管理轉(zhuǎn)基因作物，就需要快速而簡便的檢測方法

RPA技術(shù)試水二代測序的文庫制備
未來，經(jīng)過優(yōu)化的RPA技術(shù)將有望用于二代測序的樣本制備。